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Bcl-2抑制劑(ABT-263)

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-09 12:54:50瀏覽次數:178次

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貨號 FS-X9653
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產品介紹:

Navitoclax,又稱ABT-263,是一種強效的,口服生物活性的Bcl-2蛋白家族抑制劑,作用于Bcl-xL,Bcl-2和Bcl-w,Ki分別為≤0.5 nM,≤1 nM和≤1 nM。Navitoclax對多種細胞具有抗腫瘤活性,如H146、H82、H889、H1963和H1417等,并引起體內腫瘤衰退。而且,Navitoclax可以增強化療藥物的治療效果。

【該產品僅用于科研實驗,不能用于人體】

靶點:Bcl-2

:923564-51-6

分子式:C47H55ClF3N5O6S3

分子量:974.6

外觀:粉末

純度:≥98%

溶解性:易溶于DMSO

儲存條件:-20℃,有效期24個月

中文名稱:Bcl-2抑制劑(ABT-263)

英文名稱:Navitoclax(ABT-263)

產品規格:5mg

貨號:FS-X9653

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

絲蛋白Cγ(FLNC)elisa檢測試劑盒  英文名稱:FLNC ELISA Kit,FLNC,

水通道蛋白7(AQP7)elisa檢測試劑盒  英文名稱:AQP7 ELISA Kit,AQP7,

嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1)elisa檢測試劑盒  英文名稱:BTN1A1 ELISA Kit,BTN1A1,

造骨細胞鈣黏蛋白(CDHOB)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CDHOB ELISA Kit,CDHOB,

原鈣黏su19(PCDH19)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PCDH19 ELISA Kit,PCDH19,

原肌球調節蛋白4(TMOD4)elisa檢測試劑盒  英文名稱:TMOD4 ELISA Kit,TMOD4,

異連蛋白β(DTNβ)elisa檢測試劑盒  英文名稱:DTNβ ELISA Kit,DTNβ,

胰蛋白(PANCPIN)elisa檢測試劑盒  英文名稱:PANCPIN ELISA Kit,PANCPIN,

煙型受體β1(CHRNβ1)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CHRNβ1 ELISA Kit,CHRNβ1,

血小板反應蛋白解整合su金屬肽mei4(ADAMTS4)elisa檢測試劑盒  英文名稱:ADAMTS4 ELISA Kit,ADAMTS4,

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CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa檢測試劑盒  英文名稱:CXCR4 ELISA Kit,CXCR4,

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Ca2+激活K+通道蛋白2(KCNN2)elisa檢測試劑盒  英文名稱:KCNN2 ELISA Kit,KCNN2,
Bcl-2抑制劑(ABT-263)benchun醚10標準品  規格:200mg  英文名稱:Nonoxynol 10

馬來suan噻嗎爾標準品  規格:200mg  英文名稱:Timolol Maleate

吲達帕an標準品  規格:250mg  英文名稱:Indapamide

jia羥松標準品  規格:500mg  英文名稱:Medrysone

fu烷標準品  規格:1ml  英文名稱:Isoflurane

芐西林茚滿鈉標準品  規格:300mg  英文名稱:Carbenicillin Indanyl Sodium

benchun醚9標準品  規格:0.5ml  英文名稱:Nonoxynol 9

萘磺suan氧芬標準品  規格:1g  英文名稱:Propoxyphene Napsylate CII

甘油單亞油suan酯標準品  規格:500mg  英文名稱:Glyceryl Monolinoleate

脫氧升麻烴標準品  規格:20mg  英文名稱:23-EPI-26-Deoxyactein

 


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