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貨號 | FS-X10183 |
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產品介紹:
用途: 無需切片既可染色,從整體上顯示植物體內鐵分布的植物體內鐵元素染色。 注意事項: 因材料種類、切片厚薄的不同,染色時間也不同。 儲存條件:RT,避光,12個月 |
中文名稱:植物組織鐵染色液
英文名稱:
產品規格:2×50ml
貨號:FS-X10183
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
屎腸球菌粒-巨噬集落激因子受體β抗體Human UHRF1 大鼠抑胃肽(GIP)免疫試劑盒
硬結節桿菌生長停滯特異性蛋白8抗體Human UIMC1 大鼠抑瘤M受體(OSMR)免疫試劑盒
Massilia duraG蛋白偶聯受體GPR135蛋白抗體Human UIMC1 大鼠抑瘤M(OSM)免疫試劑盒
宇佐美曲霉磷脂酰基蛋白聚糖-5抗體Human UMPS 大鼠異檸檬脫氫(ICD)免疫試劑盒
中慢生華癸根瘤菌GADD45γ相互作用蛋白1抗體Human ULBP1 大鼠乙酰羧化合成(ACC)免疫試劑盒
島生坂野酵母GTP結合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白)Human UL27 大鼠乙酰 免疫試劑盒
香菇磷化gamma基丁B型受體1抗體Human UNC119 大鼠乙酰酯(AChE)免疫試劑盒
假單胞菌磷化谷受體2抗體Human UNC13A/Munc13-1 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒
膠孢磷化鳥調節蛋白12抗體Human UCHL3 大鼠乙酰(Ach)免疫試劑盒
金色毛殼珠蛋白轉錄因子1抗體Human UBXN11 大鼠乙脫氫(ALDH)免疫試劑盒
Pseudomonas plecoglossicida 過氧化3Human UGT2B4 大鼠乙脫氫(ADH)免疫試劑盒
Xenorhabdus過氧化4抗體Human UGP2 大鼠胰脂肪(PL)免疫試劑盒
阿氏芽孢桿菌高爾基體膜蛋白GP73抗體Human CLDN2(Claudin-2) 大鼠胰高血糖樣肽2(Glp-2)免疫試劑盒
大腸桿菌G蛋白偶聯受體172B抗體Human UCHL5 大鼠胰高血糖樣肽1(Glp-1)免疫試劑盒
釀酒酵母生發中心B淋巴相關蛋白2抗體Human UCHL5IP 大鼠胰高血糖(GC)免疫試劑盒
非無菌藥品 沙門菌(陽性)G蛋白轉錄因子α3抗體Human UGT2B7 大鼠胰多肽 免疫試劑盒
假絲酵母Candida│sp. 質量規格:電鍍脫色,200目,from wood萊苞迪甙C
: 175244資源名稱: 福氏志賀氏菌 質量規格:催化劑載體,8-16目羌活
鏈霉菌(灰褐類群)Streptomyces│caeruleatus 質量規格:凈、氣體純化,棒,φ1.0mm胡蘿卜
植物組織鐵染色液乳乳球乳亞種 1-(二苯基)哌基質金屬蛋白抑制因子1
葡萄座腔屬 環乙酯基質金屬蛋白抑制因子2
大腸埃希 3,3'-二甲腺原基質金屬蛋白抑制因子3
產氣列契瓦尼爾氏 對氟苯甲基質金屬蛋白抑制因子4
大腸埃希 6-氟-3-(4-基)-1,2-苯并異噁唑鹽鹽基質衍生因子1
芬尼青霉 1-乙基-4-氟苯基質衍生因子1α
云芝栓孔(變色栓) 2,3,4-三氟苯基質相互作用分子1
枝孢屬 3-氟肉桂激活A
鏈霉 1-(4-甲氧基苯基)哌鹽鹽激活B
釀酒酵母 3-(3-氟苯基)低密度脂蛋白
宇佐美曲霉 3-氟-4-羥基幾丁質3
有柄樹舌靈芝(白芝) 間氟苯乙幾丁質3樣蛋白3
異常漢遜酵母 4,7-雙(5-溴-4-辛基噻吩-2-基) 苯并[c][1,2,5]噻二唑己糖激
葡萄座腔 二喹啉己糖激2
枯草芽孢桿 1-(3-氨基)-4-甲基哌甲胎蛋白
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