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貨號 | FS-X10085 |
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培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:油紅O染色液(細胞涂片專用)
英文名稱:
產品規格:4×20ml|4×50ml
貨號:FS-X10085
產品介紹:
用途: 專門用于脂肪/脂滴染色 注意事項: 主要由油紅O異丙醇飽和液組成,染色后脂滴呈橘紅色。 儲存條件:4℃,12個月 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span> 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
蠟狀芽孢桿菌D型多巴色脫羧Human STAB1(Stabilin-1) 人垂體腺環化激活肽(PACAP)免疫試劑盒
委內瑞拉鏈霉菌DNA聚合α抗體Human AMELX(Amelogenin, X isoform) 人垂草扁桃(VMA)免疫試劑盒
麗齒菌屬MREG蛋白抗體Human RYR1(Ryanodine receptor 1) 人穿孔/成孔蛋白(PRF1/PFP)免疫試劑盒
鹽古桿菌RAS相關抑生長蛋白1抗體Human SFRP5(Secreted frizzled-related protein 5) 人程序性死亡因子4(PDCD4)免疫試劑盒
分枝節桿菌MAP激激活死亡域蛋白2C抗體Human CA14(Carbonic anhydrase 14) 人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)免疫試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)甲狀腺5'脫3抗體Human RAP1GDS1(Rap1 GTPase-GDP dissociation stimulator 1) 人程序性死亡-1(PD-1)免疫試劑盒
腸沙門氏菌腸亞種D型阿片受體抗體Human PLIN1(Perilipin-1) 人成纖維生長因子9(FGF9)免疫試劑盒
戊糖片球菌畸形表皮自調節因子1抗體Human IFNAR1(Interferon alpha/beta receptor 1) 人成纖維生長因子8(FGF8)免疫試劑盒
扣囊復膜孢酵母腦發育同源蛋白2抗體Human SH3GL1(Endophilin-A2) 人成纖維生長因子6(FGF6)免疫試劑盒
紅曲霉周期D相互作用蛋白1抗體Human IKZF1(DNA-binding protein Ikaros) 人成纖維生長因子4(FGF4)免疫試劑盒
尖針芽孢酵母發育相關蛋白DDX3Y抗體Human KRT2(KeRatin, type II cytoskeletal 2 epidermal) 人成纖維生長因子23(FGF-23)免疫試劑盒
鏈霉菌屬核仁蛋白NAP57抗體Human OPTC(Opticin) 人成纖維生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)免疫試劑盒
氧化微桿菌DLST蛋白抗體Human DBH(Dopamine beta-hydroxylase) 人成纖維生長因子13(FGF-13)免疫試劑盒
臘狀芽胞桿菌橋粒斑蛋白1+2抗體Human VNN1(Pantetheinase) 人成纖維生長因子10(FGF10)免疫試劑盒
草鏈霉菌橋粒芯糖蛋白2抗體Human MTDH(Protein LYRIC) 人巢蛋白1(NID1)免疫試劑盒
日本曲霉發育相關蛋白DAZL抗體Human NANOG(Homeobox protein NANOG) 人超敏熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質量規格:粒徑0.350 - 0.600 mm常春藤D
JCM1553=ATCC11443=BCRC12321資源名稱: 鼠李糖乳桿菌 質量規格:分析標準品常春藤C
圓錐節叢孢Arthrobotrys│conoides 質量規格:10μg/ml,u=4%二氫歐山芹
油紅O染色液(細胞涂片專用)解淀粉芽孢桿 N-芐氧羰基-D-蘇酯D
腐皮鐮孢 磺噠類黃酮-3',5'-羥化
微枝形桿 雙(6,6,7,7,8,8,8,-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮)銅類黃酮3'-羥化
釀酒酵母 異喹啉-5-甲UDP-葡萄糖-3-O-類黃酮糖轉移
小果豆包 5-(三氟甲基)吡啶-2-甲半乳糖
惡臭假單胞 5-溴-7-硝基二氫羧甲基纖維
噬果膠黃桿 棕櫚蠟,3#β-葡聚糖
釀酒酵母 環氧大豆油多聚半乳糖裂解
頂青霉 L-2-抗營養因子
梨紅菇 3--D-苯總木脂
環狀芽孢桿 BOC-L-4-鳥轉氨
瑟氏泰勒蟲(寧縣株) 牛至油脯脫氫
魯氏接合酵母 小燭樹蠟△1-吡咯啉-5-羧合成
食環氧化物交替紅色桿 三(乙基)環戊二烯六氟磷釕α-轉運蛋白
孟氏假單胞 異基羥吡啶
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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