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快速瑞氏染液

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品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 15:09:10瀏覽次數(shù):174次

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貨號 FS-X9791
產(chǎn)品介紹:
瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。
操作步驟
1. (選做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室溫固定15-30 分鐘。
2. 吸去固定液,室溫通風晾干。
3. 將試劑一滴加到載玻片上,均勻覆蓋住載片上血細胞,染色時間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢時,迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。
4. 小股水流洗片,防止將大量的細胞從載片上沖落下來從而影響以后的觀

產(chǎn)品介紹:

瑞氏染液主要應(yīng)用于血液和骨髓涂片染色。

操作步驟

1. (選做)平置血涂片于染色架上,滴加甲醇固定液,室溫固定15-30 分鐘。

2. 吸去固定液,室溫通風晾干。

3. 將試劑一滴加到載玻片上,均勻覆蓋住載片上血細胞,染色時間約為1 分鐘。等染液有變紅的趨勢時,迅速滴加兩倍試劑一的量的試劑二。繼續(xù)染色5 到8 分鐘。

4. 小股水流洗片,防止將大量的細胞從載片上沖落下來從而影響以后的觀察。30s 水洗結(jié)束后將載片放到陰涼處風干。

5. 顯微鏡鏡檢。

染色結(jié)果

1. 紅細胞呈淺紅色,中央稍淡而略有蝶形態(tài)。

2. 白細胞系統(tǒng)清晰易分,細胞膜清晰呈紫黑色,細胞核著色呈深淺不同的紫紅色,胞漿中各種顆粒區(qū)分明顯。其中中性粒細胞漿中顆粒呈淡紫紅色,嗜酸粒細胞漿中顆粒呈桔紅色、嗜堿性粒細胞胞漿中顆粒呈藍褐色。單核細胞的胞漿呈灰藍色,胞漿中顆粒呈細小淡紫紅色或藍紫色。淋巴細胞胞漿呈淡藍色。

注意事項

1. 推片:取全血3 微升左右置載玻片上,將推玻片保持與載玻片30 度角,置于血滴正前方,稍往后移與血滴接觸,即可見血液沿推片下緣散開,再勻速沿載玻片平面向前滑動,至血液鋪完血膜為止。

2. 涂片時不要太厚也不要太薄,太厚紅細胞重疊并易皺,太薄時不易找到白細胞。

3. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架上。血膜要干透后才能染色,否則染色時血膜易脫落。

4. 試劑一及二染液不能過少,以防很快蒸發(fā)引起染液沉淀。試劑一不可少于400 微升,試劑二是試劑一的1 倍量。滴加試劑一及二時要輕搖玻片或用洗耳球?qū)恃禋猓谷疽撼浞只旌稀?/span>

5. 鏡檢時如果紅細胞偏藍,請放在蒸餾水中1-3 分鐘,直至紅潤為止。

6. 染色過淡,可復(fù)染。染色過深,可用水沖洗或浸泡,還可用75%乙醇脫色3-5 秒。

儲存:2~8℃,避光,有效期12個月。

中文名稱:快速瑞氏染液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:250ml×3

貨號:FS-X9791

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。

肌侵蛋白(MTPN)英文名:MTPN 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g

肌腱蛋白X(TNX)英文名:TNX 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5MG

肌肌激(CKM)英文名:CKM 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝1g

肌紅蛋白(MYO)英文名:MYO 磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體包裝5g

肌三磷(ITPA)英文名:ITPA βA3/A1-crystallin蛋白抗體包裝25g

肌鈣蛋白T()英文名: γS-crystallin蛋白抗體包裝100g

肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)英文名:ARPC4 1號染色體開放閱讀框85抗體包裝25g

饑餓(GHRL)英文名:GHRL 1號染色體開放閱讀框87抗體包裝5g

回腸脂肪結(jié)合蛋白(FABP6)英文名:FABP6 1號染色體開放閱讀框95抗體包裝25g

黃體激(LH)英文名:LH 補體C1S鏈多肽抗體包裝5g

脫氫(XDH)英文名:XDH 20號染色體開放閱讀框106抗體包裝50g

緩激肽(BK)英文名:BK 20號染色體開放閱讀框107抗體包裝100g

環(huán)氧化合物解4(EPHX4)英文名:EPHX4 20號染色體開放閱讀框117抗體包裝25g

環(huán)加氧2(PTGS2)英文名:PTGS2 20號染色體開放閱讀框118抗體包裝100g

環(huán)加氧1(PTGS1)英文名:PTGS1 20號染色體開放閱讀框144抗體包裝25g

曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品整合α2試劑盒乙酰紫草;Acetylshikonin

型副傷寒沙門菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)整合A5試劑盒異丹葉大黃;Isorhapontige

花津浦芽孢桿菌Bacillus│hwajinpoensis 質(zhì)量規(guī)格:>97%,USP34,BR真胰島試劑盒7-乙基;7-Ethylcampt
快速瑞氏染液平菇—875 6-溴-4-羥基-3-喹啉羧乙酯組

異形盤孢 -2-苯乙酯組蛋白H3

蘇云金芽孢桿 苯甲酯組蛋白H4

葡萄座腔 2-脫氧-2,2-二氟-D-赤式-五呋喃糖-3,5-二苯甲酯-1-甲磺酯組蛋白去乙酰化

新城疫病 磺間甲氧嘧啶組蛋白去乙酰化1

孢吸水鏈霉 2,5-吡二羧組蛋白去乙酰化3

巴氏醋桿 對乙酮組蛋白去乙酰化9

小豆交鏈孢霉 對羥基正辛酯組蛋白乙酰化

副豬嗜血桿 2'--4',5'-二氟苯乙酮組織蛋白B

栗疫 2-甲氧基-3-三氟組織蛋白K

運動節(jié)桿 5-溴-2-苯甲組織蛋白L

芍藥枝孢霉 2-甲氧基-3-三氟甲基-5-溴吡啶組織蛋白S

釀酒酵母 3,5-二氟-4-吡啶甲組織蛋白X

樹舌靈芝 硫化鋰組織多肽抗原

變異鏈霉 亞乙基脲(2-咪唑酮)組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A

 


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