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貨號 | FS-X9659 |
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產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit | 100T | FS-X9659 |
產品介紹:
本試劑盒各組分均以無菌形式提供,可直接用于細胞實驗。臺盼藍(Trypan Blue),一種偶氮、親水性酸性藍色染料,可透過死亡細胞和垂死細胞的細胞膜,將其染成藍色,而活細胞由于其細胞膜的完整性,可將臺盼藍排斥在外,因此,通過顏色的變化即可將活細胞(活細胞呈透明無色)和死細胞鑒別開來,基于此原理,本品廣泛用于細胞活性水平的常規評估。臺盼藍還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍與蛋白結合形成的復合物可發出紅色熒光。另外,臺盼藍(合適濃度)還常用來淬滅細胞表面的自熒光或者其他熒光信號。 使用方法 1)對于懸浮細胞,離心收集細胞,對其充分清洗后,加入適量細胞重懸液重懸細胞制成單細胞懸液;對于貼壁細胞,先用消化細胞,再按照懸浮細胞的方法制備單細胞懸液。 2)取0.1ml單細胞懸液,按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍染色液充分混勻,室溫染色3~10min。 【注】:因臺盼藍具有細胞毒性,染色時間過久會導致部分死細胞染色,干擾計數。通常染色3min即可。 3)取少量上述染色細胞加入血細胞計數板,于顯微鏡低倍鏡下計數,分別計算著色細胞(即損傷細胞和死細胞)和總細胞。 【注1】:用移液槍加染色細胞時,沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其*覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。 【注2】:1mm2方格內細胞數通常控制在20-50 cells,當細胞數超過200個,需重新調整稀釋倍數。 4)按照以下公式來計算細胞數目和活細胞百分比, a,計算每ml細胞數目:Cells/ml=1mm2大方格內的平均細胞數×稀釋倍數×104;【注】:此時的稀釋倍數為:步驟2所取的單細胞懸液與臺盼藍染色液混合后的稀釋倍數 b,總細胞數目:Total cells=(Cells/ml)×初制備單細胞懸液的總體積 c,細胞活力值:Viability(%)=(總細胞數-總著色細胞數)/總細胞數×100 【注】:通常情況,健康的對數期培養細胞,活細胞至少占到95%。 儲存條件:室溫,有效期2年 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
細胞周期suK(CCNK)檢測試劑盒 forCyclinK(CCNK)
分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)檢測試劑盒 forSecretograninII(SCG2)
生長調節致癌基因β(GROβ)檢測試劑盒 forGrowthRegulatedOncogeneBeta(GROb)
輸出蛋白7(XPO7)檢測試劑盒 forExportin7(XPO7)
糖蛋白130(gp130)檢測試劑盒 forGlucoprotein130(gp130)
V-Fos-FBJ骨肉瘤病毒癌基因同源物(FOS)檢測試劑盒 forV-FosFBJMurineOsteosarcomaViralOncogeneHomolog(FOS)
白介su17(IL17)檢測試劑盒 forInterleukin17(IL17)
失調蛋白3(ATXN3)檢測試劑盒 forAtaxin3(ATXN3)
半胱氨suan蛋白mei抑制劑6(CST6)檢測試劑盒 forCystatin6(CST6)
腫瘤壞死因子配體超家族成員9(TNFSF9)檢測試劑盒 forTumorNecrosisFactorLigandSuperfamily,Member9(TNFSF9)
IgE-Fc受體Ⅰ(FcεRⅠ)檢測試劑盒 forReceptorIForTheFcRegionOfImmunoglobulinE(FceRI)
平滑肌肌動蛋白α2(ACTα2)檢測試劑盒 forActinAlpha2,SmoothMuscle(ACTa2)
惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)檢測試劑盒 forDeletedInMalignantBrainTumors1(DMBT1)
淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒 forAmyloidBetaPeptide1-42(Ab1-42)
基質金屬蛋白mei3(MMP3)檢測試劑盒 forMatrixMetalloproteinase3(MMP3)
己糖激mei2(HK2)檢測試劑盒 forHexokinase2(HK2)
層粘連蛋白β4(LAMβ4)檢測試劑盒 forLamininBeta4(LAMb4)
臺盼藍染色法細胞活力檢測試劑盒克拉曲濱相關物質A標準品 規格:20mg 英文名稱:Cladribine Related Compound A
克林霉su磷suan酯標準品 規格:250mg 英文名稱:Clindamycin Phosphate
西替利嗪相關物質A標準品 規格:20mg 英文名稱:
美昔康相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:
山梨suan鉀標準品 規格:1g 英文名稱:Potassium Sorbate (AS)
羅布考相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:
周效磺an標準品 規格:200mg 英文名稱:Sulfadoxine
jia酚曲zuo標準品 規格:25mg 英文名稱:Drometrizole
鹽suan強力霉su標準品 規格:200mg 英文名稱:Doxycycline Hyclate
L-巖藻糖標準品 規格:200mg 英文名稱:L-Fucose (AS)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的*細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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