遮天,小说阅读网站,好看的课外书

貨號	FS-X9818

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：死細胞核酸染料-綠菁SYTOX

英文名稱：

產品規格：500μL

貨號：FS-X9818

產品介紹:

SYTOX 綠色死細胞核酸染料( Ex/Em: 502/525 nm, bound to DNA)是一種可輕易穿過受損細胞質膜而不能透過活細胞質膜的綠色核酸染料，其在于核酸結合之后熒光強度會得到超過500 倍的顯著增強。SYTOX 綠色死細胞核酸染料可以用于染死的真核細胞的RNA和DNA，在革蘭氏細菌中同樣也適用。使用者可以利用氬激光激發器的488nm（或者其他任何帶有450-490nm 激發光源的激發器）激發染料。

SYTOX 綠色死細胞核酸染料可用于多色熒光分析，在不同的實驗應用中染固定細胞的核酸，如，熒光顯微鏡、熒光酶標儀，流式細胞儀上。

儲存：-20℃，避光，有效期6個月。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Toll樣受體4(TLR4)英文名：TLR4 表面趨化因子受體1抗體包裝1g

Toll樣受體3(TLR3)英文名：TLR3 表面趨化因子受體2抗體包裝100g

Toll樣受體2(TLR2)英文名：TLR2 表面趨化因子受體3抗體包裝25g

Thy1細胞表面抗原(Thy1)英文名：Thy1 表面趨化因子受體4抗體包裝500g

TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)英文名：TIEG1 活化半胱蛋白蛋白-3抗體包裝25ml

TATA框結合蛋白關聯因子12(TAF12)英文名：TAF12 抗Ⅵ型膠原抗體包裝5ml

SRC/FGR/YES相關FYN癌基因(FYN)英文名：FYN 半胱蛋白8抗體包裝25g

Smad同源物7(Smad7)英文名：Smad7 信號轉導蛋白亞基8抗體包裝5g

Smad同源物3(Smad3)英文名：Smad3 表面趨化因子受體10抗體包裝1g

Smad同源物2(Smad2)英文名：Smad2 轉鐵蛋白受體抗體包裝5g

Smad同源物1(Smad1)英文名：Smad1 鈣粘蛋白相關的神經受體2抗體包裝1g

Slit同源物3(Slit3)英文名：Slit3 周期檢測點激1抗體包裝25g

Slit同源物2(Slit2)英文名：Slit2 鈣粘蛋白相關的神經受體1抗體包裝5g

Slit同源物1(Slit1)英文名：Slit1 尾側型同源轉錄因子2/3抗體包裝1g

Sideroflexin1蛋白(SFXN1)英文名：SFXN1 周期H抗體包裝5g

白色鏈霉菌Streptomyces│albus 質量規格：HPLC>98%,標準品異質性胞核核糖核蛋白A1試劑盒亞麻;Gamma linolenic

香菇Lentinula│edodes 質量規格：>98%,國產美侖異質性胞核核糖核蛋白A0試劑盒野漆樹;Rhoifolin

ATCC43308資源名稱: 鰻弧菌質量規格：>98%,異質核糖核蛋白Q試劑盒葉黃制菌;Xanthatin
死細胞核酸染料-綠菁SYTOX藤黃微球鹽阿洛司瓊琥珀脫氫

土生哈薩克斯坦酵母 1-BOC-吡咯烷-3-甲酰類嗜TⅠ型病

短波單胞 1-Boc-3-吡咯烷甲甲酯類T白血病病抗體

凍土毛霉 2,6-二溴-4,8-雙[(2-乙基己基)氧基]-苯并[1,2-B:4,5-B']二噻吩α1受體自身抗體

柑橘莖點 4-甲氧基-7-氮雜半胱

變幻青霉 2-哌甲甲酯相關蛋白A抗體

紅根須腹 4--3-甲氧基-2- N-氧化物幽門螺旋桿抗體

康寧木霉 2-乙酰氧基-2,4-二氟苯乙酮葡萄糖

總狀毛霉 N,N’-二-（2-辛基十二烷基）-2,3,6,7-四溴-1,4,5,8-萘四羧二酰乳

蟲草屬 3-叔丁氧羰基氨基-1-甲叔丁酯蛋白激C結合蛋白1

四川散斑殼 9,10-二基蒽內臟脂肪特異性絲蛋白抑制劑

馬賽對甲叔丁酯血管緊張轉化

白地霉 4-辛氧基苯端粒

糙皮側耳 5-溴-3-(三氟甲基)-2-基吡啶膳食纖維

釀酒酵母 1-BOC-哌-2-甲膜聯蛋白-V
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)