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貨號 | FS-X10088 |
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產品介紹:
用途: 脂肪、磷脂染色,又稱SBB染色液。 注意事項: 主要由蘇丹黑B,核固紅染液組成。中性脂肪呈黑色,磷脂呈灰黑色。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
中文名稱:蘇丹黑B染色液
英文名稱:
產品規格:2×50ml|2×100ml
貨號:FS-X10088
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
綠孢環柄菇雙PHD-D4鋅指蛋白2抗體Human LARP7(La-related protein 7) 人補體7(C7)免疫試劑盒
耐久腸球菌雙特異性磷22抗體Human COL10A1(Collagen alpha-1(X) chain) 人補體3裂解產物(C3SP)免疫試劑盒
擬青霉Erdj5/DNAJC10蛋白抗體Human COL7A1(Collagen alpha-1(VII) chain) 人補體1抑制物抗體-IgM(C1INH-IgM)免疫試劑盒
潮濕乳菇腫瘤調亡/腫瘤壞死因子受體死亡受體6抗體Human DDX42(ATP-dependent RNA helicase DDX42) 人補體1抑制物抗體-IgG(C1INH-IgG)免疫試劑盒
樟疫霉跨膜TMIGD1蛋白抗體Human BDG(beta-D-glucan) 人補體1q(C1q)免疫試劑盒
黑曲霉軸絲中鏈動力蛋白抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) 人玻連蛋白(VTN)免疫試劑盒
禾谷鐮孢*軸絲動力蛋白7抗體Human SKI (Ski oncogene) 人波形蛋白(VIM)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌環指蛋白19抗體Human HMGA2(High mobility group protein HMGI-C) 人并殖吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌δ-連環蛋白抗體Human WDTC1 (WD and tetratricopeptide repeats protein 1) 人并殖吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒
黃桿菌屬防御β2抗體Human CHIT1(Chitotriosidase-1) 人型肝炎病(HCV)核心抗原(HCV core Ag)免疫試劑盒
青霉磷化信號轉導功能磷蛋白DAB2抗體Human UXS1 (UDP-glucuronic acid decarboxylase 1) 人型肝炎IgM(HCV-IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌雙氧化1/甲狀腺氧化1抗體Human UFL1 (E3 UFM1-protein ligase 1) 人型肝炎IgG(HCV-IgG)免疫試劑盒
綠僵菌雙氧化2/甲狀腺氧化2抗體Human WDSUB1 (WD repeat, SAM and U-box domain-containing protein 1) 人酰羧化β多肽(PCCB)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母雙氧化成熟因子抗體Human TAT (Tyrosine aminotransferase) 人烯(ACR)免疫試劑盒
爪哇毛霉胞質分裂專一蛋白7抗體Human WRAP73 (WD repeat-containing protein WRAP73) 人脫氫E1(PDH E1)免疫試劑盒
嗜腐爛居真菌細菌DNA損傷誘導轉錄樣蛋白4抗體Human URGCP (Up-regulator of cell proliferation) 人激R型同工(R-PK)免疫試劑盒
日本根霉Rhizopus│japonicus 質量規格:分析標準品大豆皂Ba
: M1資源名稱: 傷門氏菌 質量規格:分析標準品(for titrimetry),≥99.5%(HPLC)賽門I
泡囊短波單胞菌Brevundimonas│vesicularis 質量規格:分析標準品,≥99%甜茶
蘇丹黑B染色液芽孢桿 2-雙環已基膦-2 ',6'-二異氧基聯苯亞硝還原
臭曲霉 庚基-β-D-吡喃葡萄糖甘脫羧
茄鐮孢 2--3-吡啶絲乙轉氨
交鏈孢屬 3,5-雙(三氟甲基)苯甲酰甘甜菜堿
假絲酵母屬 4、4'-二氨基苯酰替苯嘔吐
大豆慢生根瘤 (S)-2,5-二氫-3,6-二甲氧基-2-異基吡乙酰乳合成
雙孢蘑菇 1-乙炔基-1-環己還原態煙酰腺二核磷
空腸彎曲桿 L-羥鈷氧化態煙酰腺二核磷
煙色毛霉 N,N'-雙芴甲氧羰基-L-賴GDP-L-半乳糖磷
Gillisia limnaea 4,5-二氟-2-GDP-D-甘露糖焦磷化
大腸埃希 硫酰幾丁質
柳巴克利酵母 水合肼 一水合物谷脫羧
德爾布有孢酵母 高鈉 一水合物γ-氨基丁轉氨
綠針假單胞 化鈰(III)葡萄糖焦磷化
黃多孔 鎢鎘淀粉分支
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