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貨號 | FS-X10189 |
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中文名稱:海水藻保存液Ⅱ
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X10189
產品介紹:
用途: 含有福爾馬林、甘油等。 注意事項: 推薦用于海水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉入保色液中長期保存。 儲存條件:室溫,避光,12個月 |
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
伴放線菌團聚桿菌葡萄糖轉運蛋白3抗體Human TTLL10 大鼠血管內皮生長因子C(VEGF-C)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌凝溶膠蛋白抗體Human TWF1 大鼠血管內皮生長因子B(VEGF-B)免疫試劑盒
膠孢生長激釋放激抗體Human TTRAP 大鼠血管內皮生長因子(VEGF)免疫試劑盒
堿湖迪茨氏菌膠質纖維性蛋白抗體Human TWIST1(Twist-related protein 1) 大鼠血管緊張轉化2(ACE2)免疫試劑盒
雜色曲霉綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)Human TUB 大鼠血管緊張轉化(ACE)免疫試劑盒
異配囊接霉生長激受體抗體Human UBE4B 大鼠血管緊張原(aGT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌腦腸肽抗體Human TXNDC4 大鼠血管緊張Ⅱ受體1(AT1R)抗體免疫試劑盒
栗酒裂殖酵母糖蛋白A33抗體Human UBAP1 大鼠血管緊張Ⅱ受體1(AT1R)免疫試劑盒
細鏈格孢腦腸肽抗體Human UBAC2 大鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
柑橘青霉菌胰高血糖樣肽-2抗體Human UBC 大鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒
光帽鱗傘G蛋白偶聯受體GPR114蛋白抗體Human TXNDC5(Thioredoxin domain-containing protein 5) 大鼠血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
肉桂球形孢囊菌膠質源性連接蛋白抗體Human UBASH3A 大鼠血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌糖蛋白VI/六糖蛋白抗體Human TWF1 大鼠血管動蛋白(AMOT)免疫試劑盒
大腸桿菌鳥還原1抗體Human TWIST1(Twist-related protein 1) 大鼠雄烯二(ASD)免疫試劑盒
巨獸芽孢桿菌G2期/S期應答相關蛋白1抗體Human TTRAP 大鼠胸腺β-4(TMSB4X)免疫試劑盒
聚貪噬菌磷化GATA結合蛋白4抗體Human TWIST2 大鼠胸腺基質淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒
木霉Trichoderma│sp. 質量規格:60-80目,氣相、液相色譜柱澳洲茄邊堿
耳炎短桿菌Brevibacterium│otitidis 質量規格:80-100目,氣相、液相色譜柱澳洲茄堿
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質量規格:干燥劑用鹽小檗
海水藻保存液Ⅱ葡紫紅菇 2-溴-4-甲尿肌酐
紫紅曲霉 2-甲氧基對苯二尿
凍土毛霉原變型 1,8-二蒽醌尿氮
三隔鐮刀 2,3-二苯磺酰尿
芽孢桿屬 更韋尿微量白蛋白
釀酒酵母 3-溴溴芐檸檬合
雙孢菇 3,6-二噠-4-凝溶膠蛋白
異常威克漢姆酵母 2-巰基噻唑凝血抗凝血復合物
大腸埃希 2-溴-5-苯Ⅶ
球孢白僵 3,5-二-2-氟吡啶Ⅷ相關抗原
類布氏乳桿 2-氨基-3,4-二XIII A
礦泉水 鈣、鎂、、鈉、鍶、硒、偏硅 5-溴-2--4-(三氟甲基)吡啶牛血清白蛋白
栗疫 L-3-溴苯膀胱腫瘤抗原
巴氏醋桿 4-甲基噻唑-5-甲皮質
釀酒酵母 2-溴環己酮皮質酮;腎上腺酮
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