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貨號	FS-X9546

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)

英文名稱：Caspase 3 Inhibitor Ac-DEVD-CHO

產品規格：10mM×0.1ml|5mg

貨號：FS-X9546

產品介紹:

本品是一種非常強的Caspase 3抑制劑，可以抑制由Caspase3激活導致的細胞凋亡。也可以抑制Caspase 7。本品是一種可逆的Caspase 3抑制劑，也是常用的細胞凋亡抑制劑之一，常用于觀察特定的細胞凋亡是否通過Caspase 3激活來介導?？梢杂糜谝种婆囵B細胞內的Caspase 3，也可用于抑制體外純化或粗抽提的Caspase 3。在體外對Casapse 3的IC50＝200pM。本品10mM包裝產品配制在DMSO中，可以直接使用。5mg包裝為粉末裝。

分子式：C20H30N4O1

分子量：502.5

純度：＞95%。

儲存條件：-20℃，有效期一年。

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

踝蛋白(talin)elisa檢測試劑盒英文名稱：talin ELISA Kit，talin，

過氧化物mei體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)elisa檢測試劑盒英文名稱：PPAR-γ ELISA Kit，PPAR-γ，

糖鏈抗原19-9(CA19-9)elisa檢測試劑盒英文名稱：CA19-9 ELISA Kit，CA19-9，

水通道蛋白3(AQP-3)elisa檢測試劑盒英文名稱：AQP-3 ELISA Kit，AQP-3，

羧化不全骨鈣su(ucOC)elisa檢測試劑盒英文名稱：ucOC ELISA Kit，ucOC，

生長激su(HGH)elisa檢測試劑盒英文名稱：HGH ELISA Kit，HGH，

神經穿透su1(NPTX-1)elisa檢測試劑盒英文名稱：NPTX-1 ELISA Kit，NPTX-1，

溶血補體(Hc)elisa檢測試劑盒英文名稱：Hc ELISA Kit，Hc，

去jia(NA)elisa檢測試劑盒英文名稱：NA ELISA Kit，NA，

前列腺suE2(PGE2)elisa檢測試劑盒英文名稱：PGE2 ELISA Kit，PGE2，

皮動蛋白(CTTN)elisa檢測試劑盒英文名稱：CTTN ELISA Kit，CTTN，

尿激mei型纖溶mei原激活因子(uPA)elisa檢測試劑盒英文名稱：uPA ELISA Kit，uPA，

腦紅蛋白(NGB)elisa檢測試劑盒英文名稱：NGB ELISA Kit，NGB，

脂蛋白磷脂meiA2(Lp-PL-A2)elisa檢測試劑盒英文名稱：Lp-PL-A2 ELISA Kit，Lp-PL-A2，

異質性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)elisa檢測試劑盒英文名稱：hnRNP P2 ELISA Kit，hnRNP P2，

載脂蛋白A1(apo-A1)elisa檢測試劑盒英文名稱：apo-A1 ELISA Kit，apo-A1，

胰島su原(PI)elisa檢測試劑盒英文名稱：PI ELISA Kit，PI，
Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)糖suan莫mi松標準品規格:200mg 英文名稱：Mometasone Furoate

諾普利標準品規格:300mg 英文名稱：Lisinopril

阿奇霉su標準品(定性用) 規格:75mg 英文名稱：Azithromycin Identity

維生suB2標準品規格:500mg 英文名稱：Riboflavin (Vitamin B2)

鹽suan西替利嗪標準品規格:250mg 英文名稱：Cetirizine Hydrochloride

碘代對ben二酚標準品規格:100mg 英文名稱：Iodoquinol

β-谷固chunβ-谷固chun標準品規格:300mg 英文名稱：Beta-Sitosterol

jia潑尼龍標準品規格:200mg 英文名稱：Methylprednisolone

降糖靈標準品規格:200mg 英文名稱：Phenformin Hydrochloride

左旋異腎上腺su標準品規格:200mg 英文名稱：Levonordefrin
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)