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貨號	FS-X9986

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Perenyi's脫鈣液

英文名稱：

產品規格：500ml

貨號：FS-X9986

產品介紹:

用途：

溫和脫鈣液，組織脫鈣，尤其適用于免疫組化

注意事項：

固定后對細胞核和細胞漿細微結構著色好。

儲存條件：室溫，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

釀酒酵母鈣平衡調節蛋白1抗體Human ITGA1/CD49a(Integrin alpha-1) 人血小板生長因子(PGF)免疫試劑盒

傳染性支氣管炎病阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關膠原蛋白抗體Human NKp44/NCR2(Natural cytotoxicity triggering receptor 2) 人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)免疫試劑盒

莫拉卡他莫拉菌老年癡呆相關類鈣粘蛋白CS1抗體Human NKp46/NCR1(Natural cytotoxicity triggering receptor 1) 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)免疫試劑盒

Pseudomonas 凋亡誘導蛋白NALP3抗體Human Cavin 1(Polymerase I and transcript release factor) 人血小板激活因子乙酰水解2，質(PAFAH2)免疫試劑盒

黃硬皮馬勃豬圓環病Ⅱ型衣殼蛋白抗體Human NKp30/NCR3(Natural cytotoxicity triggering receptor 3) 人血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒

鍺栓孔菌血管加壓激活鈣啟動受體蛋白1抗體Human INT8(IntegRator complex subunit 8) 人血小板反應蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)免疫試劑盒

圍小叢殼干生長因子受體/表面分化抗原抗體Human CAMP(Cathelicidin Antimicrobial Peptide) 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)免疫試劑盒

東方擬無枝菌離子通道蛋白6抗體Human INT6(IntegRator complex subunit 6) 人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)免疫試劑盒

粟酒裂殖酵母殺菌肽B/天蠶抗菌肽B抗體Human RF-IgA(Rheumatoid Factor IgA) 人血纖蛋白原γ鏈(FGG)免疫試劑盒

鞘單胞菌碳酐13抗體Human PAX-8(Paired box protein pax-8) 人血纖蛋白(Fibrin)免疫試劑盒

蜂房哈夫尼菌離子通道蛋白5抗體Human RF-IgM(Rheumatoid Factor IgM) 人血吸蟲抗原免疫試劑盒

食菌屬（噬菌屬）軸突相關粘附分子抗體Human SSB(Lupus La protein) 人血吸蟲抗體(IgM)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD1抗體Human SSA(Sjogren syndrome antigen A) 人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒

細交鏈孢霉ATP依賴的解旋CHD3抗體Human KEAP1(kelch-like ECH-associated protein 1) 人血吸蟲(SH)抗體免疫試劑盒

產芽孢梭菌（生孢梭菌）碳酐7抗體Human Acetylated HB(Acetylated Hemoglobin) 人血栓B2(TXB2)免疫試劑盒

新疆糖單孢菌膠原蛋白和鈣結合表皮生長因子結構域1抗體Human SP(Substance P) 人血栓A2合成(TX-A2)免疫試劑盒

寬松環單頂孢Monacrosporium│lysipagum 質量規格：BSFOS 樣抗原2試劑盒決明

豬布魯氏菌Brucella│suis 質量規格：>98%,BRFMS樣酪激3配體試劑盒紅景天

暗球腔菌Phaeosphaeria│sp. 質量規格：>98%,分子生物學級FMS樣酪激3試劑盒
Perenyi's脫鈣液托姆青霉 Bepotastine Besilate巨噬炎性蛋白5

靈芝(赤芝，紅靈芝) Delafloxacin趨化因子C-C-基元配體15

茶莖點霉 Cilengitide腫瘤轉移抑制基因KISS54蛋白

孟氏假單胞 Abacavir sulfate烯

泡盛曲霉 Luliconazole長鏈可溶性尿激型纖溶原激活物受體

葡萄園有孢漢遜酵母 CP-335963短鏈可溶性尿激型纖溶原激活物受體

藍微褐鏈霉 Erlotinib流感病抗體

硬結節桿 Erlotinib HCl (OSI-744)N-myc交互子

澤普林假絲酵母 Valdecoxib視黃受體反應蛋白2

施氏假單胞 Prucalopride軸突生長誘向因子4

溶桿 Bortezomib (PS-341)C-C趨化因子受體2

貝萊斯芽胞桿 Eletriptan HBr信號4B;軸突生長導向因子4B

鞘氨盒屬 Urocortin human嗜鉻蛋白A

核曲霉 Lacosamide視黃受體反應蛋白2

茄勞爾氏 TBB25羥基維生D
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)