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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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淡水藻保存液Ⅱ

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-16 16:37:28瀏覽次數(shù):170次

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貨號(hào) FS-X10191
淡水藻保存液Ⅱ正在熱銷的產(chǎn)品:KGFR/FGFR2/FITC 熒光標(biāo)記角質(zhì)形成生長因子受體/成纖維生長因子受體2抗體IgG碳烯酯 98.0%
FGFR3/FITC 熒光標(biāo)記成纖維生長因子受體3抗體IgG碳烯酯 99%
FGFR4/FITC 熒光標(biāo)記成纖維生長因子受體4抗體IgG碳酯 98%
FGF-BP/FITC 熒光標(biāo)記抗纖維生長因子結(jié)合蛋白抗體IgG碳烯酯 99%
fgl2/FITC

產(chǎn)品介紹:

用途:

含有福爾馬林、甘油等。

注意事項(xiàng):

推薦用于淡水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉(zhuǎn)入保色液中長期保存。

儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月

中文名稱:淡水藻保存液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100ml

貨號(hào):FS-X10191

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

沉積物鹽坑微菌磷化神經(jīng)生長相關(guān)蛋白43抗體Human TSTA3(GDP-L-fucose synthase) 大鼠腺病(ADV)抗體(IgG)免疫試劑盒

Brenneria salicis 糖原合激-3β抗體Human TTC1 大鼠酰基化饑餓(AG)免疫試劑盒

生活飲用水  總硬度、化物 抗粘附多肽抗體Human TSPAN31 大鼠纖維蛋白原γ鏈(Fgg)免疫試劑盒

凍膠假絲酵母腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體Human TTBK2 大鼠纖維蛋白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)免疫試劑盒

產(chǎn)朊假絲酵母神經(jīng)膜糖蛋白M6aHuman TSPAN33 大鼠纖維蛋白原α鏈(Fga)免疫試劑盒

尖鐮孢 葫蘆專化型G蛋白偶聯(lián)受體101抗體Human TSPAN5 大鼠纖維蛋白原(Fb)免疫試劑盒

南方鹽單胞菌胰高血糖樣肽-1受體/GLP-1受體抗體Human TST 大鼠纖溶抑制因子/凝血激活的纖溶抑制物(TAFI)免疫試劑盒

灰樹花-1糖磷脂酰肌抗體Human TSPAN33 大鼠纖溶原激活物抑制因子(PAI)免疫試劑盒

膠孢磷化gp130抗體Human TSPAN31 大鼠纖溶原(Plg)免疫試劑盒

球孢白僵菌S轉(zhuǎn)移ζ1抗體Human TSPYL4 大鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒

解淀粉芽胞桿菌植物亞種甘-N-酰基轉(zhuǎn)移抗體Human TSPAN5 大鼠纖連蛋白(FN)免疫試劑盒

淺囊狀栓菌甘-N-酰基轉(zhuǎn)移樣1抗體Human TSN 大鼠周期D3(Cyclin-D3)免疫試劑盒

平菇 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體Human TSNAXIP1 大鼠周期D2(Cyclin-D2)免疫試劑盒

魯氏接合酵母磷化葡萄糖合成1抗體Human TSNAX 大鼠周期D1(Cyclin-D1)免疫試劑盒

珊瑚球菌糖原蛋白1Human TSP50 大鼠因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒

皺皮菌(可訂)生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體Human TSPAN1 大鼠因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:60-80目,氣相、液相色譜柱D-四氫藥根堿

大腸桿菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:80-100目,氣相、液相色譜柱原阿片堿

杜鵑尾孢菌Cercospora│rhododendri Ferraris 質(zhì)量規(guī)格:2mm-3mm,干燥劑用去芹菜糖桔梗皂D
淡水藻保存液黑曲霉 乙松油酯嗜粒趨化因子

熱帶假絲酵母 姜黃油嗜性粒陽離子蛋白

球孢白僵 3-氨基-4-羥基-N-磺酰瘦

漆柄小孔 3--7-氮雜瘦受體

血痕韌革 N-CBZ-4-乙乙酯鼠泰澤病原體

梅林青霉 3-氟-5-(三氟甲基)-2-吡啶甲雙解絲蛋白1

鏈霉 3--5-三氟-2-羧雙氫睪酮

聚生殼 3--5(三氟甲氧)苯甲水痘帶狀皰疹病IgG抗體

葡萄座腔 2H-1,2,3-三氮唑-2-乙水通道蛋白1

粟酒裂殖酵母 4-溴-3-甲氧基苯甲水通道蛋白2

大腸埃希氏 2-溴-4-甲氧基苯甲水通道蛋白3

阿舒假囊酵母 N-甲基高哌水通道蛋白4

干草鞘氨單胞 反,反-2,4-庚二烯水通道蛋白5

杰丁畢赤酵母 2-氟烯水通道蛋白7

雞樅(雞) 5-甲基-3,4-二氫噻吩并[2,3-D]嘧啶-4-酮水通道蛋白9

 


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