當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 結晶紫染色液
貨號 | FS-X9798 |
---|
產品介紹:
結晶紫染色液是一種組織或細胞染色時常用的可以把細胞核染成深紫色的染色液。結晶紫是一種堿性染料,可以和細胞核中的DNA 結合,從而產生細胞核染色。本產品至少可以染色200 個樣品。 組成成份: 5×結晶紫染色液 20mL 稀釋液 80mL 注意事項: 需自備4%多聚。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備70%和90%乙醇,無水乙醇以及二甲苯。 第一次使用本試劑盒時建議先取1-2 個樣品做預實驗。 結晶紫對人體有害,請注意適當防護,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 儲存:RT避光,有效期一年。 |
中文名稱:結晶紫染色液
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X9798
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
干擾α(IFNα)英文名:IFNα 半胱蛋白抑制劑6抗體包裝5g
肝脂(LIPC)英文名:LIPC 碳酐相關蛋白/腦蛋白10抗體包裝1g
肝再生擴展生長因子(GFER)英文名:GFER 白介-18受體α鏈抗體包裝5g
肝(HPA)英文名:HPA 轉錄阻抑蛋白CTCF抗體包裝1g
肝結合性表皮生長因子(HBEGF)英文名:HBEGF T淋巴CD1抗體包裝25g
肝輔因子Ⅱ(HCⅡ)英文名:HCⅡ 磷化周期檢測點激2抗體包裝5g
肝腎骨堿性磷(ALPL)英文名:ALPL 網格蛋白重鏈抗體包裝1g
肝配蛋白B受體3(EPHB3)英文名:EPHB3 透明質介導游走受體抗體包裝100g
肝配蛋白B2(EFNB2)英文名:EFNB2 2號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
肝癌源性生長因子(HDGF)英文名:HDGF 2號染色體開放閱讀框60抗體包裝250mg
肝X受體α(LXRα)英文名:LXRα 磷化周期依賴性激7抗體包裝25g
甘油醛-3-磷脫氫(GAPDH)英文名:GAPDH 磷化周期依賴性激9抗體包裝5g
甘露糖受體C2(MRC2)英文名:MRC2 磷化周期檢測點激1抗體包裝5g
甘露糖受體C1(MRC1)英文名:MRC1 磷化周期檢測點激1抗體包裝1g
甘露糖結合蛋白(MBL)英文名:MBL 磷化抑癌基因p16抗體包裝250mg
香菇Lentinula│edodes 質量規格:>99.0%,培養級載脂蛋白B48試劑盒原七葉皂元;Protoaescigen
植物乳桿菌Lactobacillus│plantarum 質量規格:HPLC>99%,標準品載脂蛋白B100試劑盒鹽;EMetine Hydroc
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>98.5%,USP31,BR,可用于培養載脂蛋白A5試劑盒乙氧基血根堿;Ethoxysanguin
結晶紫染色液大腸埃希 阿卡他定白抗原B27
巨大芽孢桿 4-咪唑類白抗原B1502
地衣芽胞桿 3-苯基芐基溴抗RNA聚合III抗體
謝瓦曲霉 Nα-Fmoc-Nε-生物-L-賴還原型輔Ⅰ
草假單胞 Y-27632信號傳導子及轉錄激活子4
弗氏鏈霉 [4-(反-4-N-基環己基)苯基]甲型肝炎病IgM抗體
木菇屬 1-Boc-3-戊型肝炎病IgM抗體
瓜果腐霉 六硝基鈷(III)鈉幽門螺桿抗體
釀酒酵母 四苯基卟啉鎂幽門螺桿抗原
優美氈被 Cy5-N-羥基琥珀酰亞酯黃熱病抗原
黃色孢鏈霉 Cy5黃熱病IgG抗體
克羅諾桿屬 N-BOC-4-氧代-3-吡咯烷甲乙酯凋亡相關蛋白TFAR19
嗜熱側孢霉 鹽噻加賓抗鼠抗體
羅倫隱球酵母 5-溴-1,3-二氟-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯流行性腦膜炎球抗原
開菲爾乳桿 二二羰基雙(三苯基膦)釕(II)圍脂滴蛋白
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。