當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> 臺盼藍染色細胞存活率檢測試劑盒
貨號 | FS-X9665 |
---|
產品介紹:
產品規格:100次 臺盼藍染色液(2×)10ml 細胞稀釋液 100ml 產品保存:4℃保存,一年有效。 |
中文名稱:臺盼藍染色細胞存活率檢測試劑盒
英文名稱:
產品規格:100T
貨號:FS-X9665
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
亞jia基四氫葉suan脫氫mei1(MTHFD1)檢測試劑盒 forMethylenetetrahydrofolateDehydrogenase1(MTHFD1)
沉默調節蛋白4(SIRT4)檢測試劑盒 forSirtuin4(SIRT4)
Marapsin蛋白(MPN)檢測試劑盒 forMarapsin(MPN)
G抗原1(GAGE1)檢測試劑盒 forGAntigen1(GAGE1)
淋巴細胞功能關聯抗原1α(LFA1α)檢測試劑盒 forLymphocyteFunctionAssociatedAntigen1Alpha(LFA1a)
整合suαM(ITGαM)檢測試劑盒 forIntegrinAlphaM(ITGaM)
shi黃chun結合蛋白4(RBP4)檢測試劑盒 forRetinolBindingProtein4,Plasma(RBP4)
卵巢濾泡激su(FLCN)檢測試劑盒 forFolliculin(FLCN)
乙酰乙酰輔meiA合成mei(AACS)檢測試劑盒 forAcetoacetylCoenzymeASynthetase(AACS)
二肽基肽meiⅣ(DPP4)檢測試劑盒 forDipeptidylPeptidaseIV(DPP4)
糖抗原125(CA125)檢測試劑盒 forCarbohydrateAntigen125(CA125)
連環蛋白δ1(CTNNδ1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CTNNδ1 ELISA Kit,CTNNδ1,
人抗繆勒管激su(AMH)elisa檢測試劑盒 英文名稱:AMH ELISA Kit,AMH,
蝰蛇毒su(Viperin)elisa檢測試劑盒 英文名稱:Viperin ELISA Kit,Viperin,
巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MIP3α ELISA Kit,MIP3α,
金屬泛激蛋白1(MPS1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:MPS1 ELISA Kit,MPS1,
角蛋白20(KRT20)elisa檢測試劑盒 英文名稱:KRT20 ELISA Kit,KRT20,
臺盼藍染色細胞存活率檢測試劑盒薄荷chun標準品 規格:250mg 英文名稱:Menthol
卡莫si汀相關物質A標準品 規格:10mg 英文名稱:Carmustine Related Compound A
羅匹尼羅相關物質B標準品 規格:50mg 英文名稱:
相關物質B標準品 規格:25mg 英文名稱:
tong芬標準品 規格:200mg 英文名稱:Ketoprofen
磷suan丙吡an標準品 規格:200mg 英文名稱:Disopyramide Phosphate
釓特chun相關物質C標準品 規格:50mg 英文名稱:
瑞格列na相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:
R-西酞普蘭草suan鹽標準品 規格:10mg 英文名稱:
草suan艾si西酞普蘭對照品標準品 規格:200mg 英文名稱:Escitalopram Oxalate
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。