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DiOC6(3)碘化物

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 15:16:27瀏覽次數:209次

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貨號 FS-X9803
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Phospho-ETK (Tyr40) 化非受體性蛋白酪氨激ETK抗體石墨 99%,40nm
Eukaryo

產品介紹:

DiOC6(3),是一種膜可透性,綠色熒光的親脂性染料。,低濃度下可選擇性染色活細胞的線粒體;高濃度下,可以用于染色其他細胞器內膜,如內質網。對于固定的細胞來說,DiOC6(3)可以染色胞內膜。DiOC6(3) (excitation, 484 nm; emission, 501nm)

化學名稱:DiOC6(3)

分子式:C29H37IN2O2

分子量:572.5:53213-82-4

溶解性:溶于DMSO

儲存:-20℃,避光,有效期一年。

中文名稱:DiOC6(3)碘化物

英文名稱:3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide

產品規格:10mg

貨號:FS-X9803

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

毒蕈堿型受體M3(CHRM3)英文名:CHRM3 毛細管形態發生蛋白1抗體包裝100g

毒蕈堿型受體M2(CHRM2)英文名:CHRM2 肌鈣集蛋白/收鈣抗體包裝25g

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淀粉樣前體蛋白(APP)英文名:APP 癌胚抗原相關粘附分子3抗體包裝1ml

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)英文名:APLP1 20號染色體開放閱讀框31抗體包裝1g

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低氧誘導因子1α(HIF1α)英文名:HIF1α 鈣依賴分泌激活蛋白2/自閉癥的相關蛋白抗體包裝5g

低密度脂蛋白受體相關蛋白1(LRP1)英文名:LRP1 膽囊收縮A受體抗體包裝100mg

低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)英文名:LDLRAP1 小腦肽3抗體包裝1g

低密度脂蛋白受體(LDLR)英文名:LDLR 周期依賴性激樣5抗體包裝1g

根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格:>98%,BR,醋鹽形式遠端上游元件結合蛋白1試劑盒鹽伊立替康;Irinotecan hy

: ivcas7.00510資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質量規格:>920U/MG,USP原纖維蛋白-1試劑盒氧化前胡;Oxypeucedanin

Z20259資源名稱: 嗜熱鏈球菌 質量規格:>97%原鈣黏1試劑盒羊藿次I;Icarisid I
DiOC6(3)碘化物Paraconiothyrium sp. 4-乙乙酯植

火木層孔 六鈷鋅植

異常漢遜酵母 鹽奧洛他定癸甘油酯-1

鍺栓孔 (淡黃褐栓) 1-(N-Boc-氨乙基)哌40S核糖體蛋白S3

德氏乳桿保加利亞亞種 4-脲脊髓灰質炎病IgG抗體

脫硫弧脫硫亞種(脫硫微螺、脫硫螺、脫硫桿、脫硫芽孢弧、脫硫?。?/span> 乙二四乙銅鈉二水合物脊髓灰質炎病IgM抗體

松針散斑殼 苯基胍碳鹽可溶性CD28分子

生假絲酵母 5-甲基-2-呋喃基質金屬蛋白14

腫痂鏈霉 2,2-二甲基-3-羥基甲酯狀瘤病16抗體

光柄滑銹傘 2-甲氧基-4-甲基嘧啶狀瘤病18抗體

遼寧類芽孢桿 4-巴豆抗Sa抗體

蟻巢傘屬 羥鹽球蛋白G Fc段受體Ⅰ

大腸埃希 球蛋白G Fc段受體Ⅱ

運動節桿 三乙酰酮鋁性休克綜合征1

釀酒酵母 3,5-二溴吡啶-4-甲色P4502D6

 


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