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| 貨號 | FS-X9668 |
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中文名稱：DAPI溶液(即用型)
英文名稱：DAPI solution(ready-to-use)
產品規格：10ml|50mL
貨號：FS-X9668
產品介紹:
本產品為DAPI水溶液，為即用型工作液，可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。 號：28718-90-3 分子式：C16H15N5·2HCl 分子量：350.25 純度：≥90% (HPLC和 TLC) 儲存條件：-20℃避光，有效期一年。 DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)是一種能夠與DNA中大部分A，T堿基相互結合的熒光染料﹐常用于熒光顯微鏡觀測。因為DAPI可以透過完整的細胞膜﹐它可以用于活細胞和固定細胞的染色。當DAPI與雙鏈DNA結合時，大吸收波長為358nm，大發射波長為461nm。DAPI的發射光為藍色，且DAPI和綠色熒光蛋白GFP或Texas Red染劑(紅色熒光染劑)的發射波長僅有少部分重疊，可以利用這項特性在單一的樣品上進行多重熒光染色。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
牙骨質蛋白1(CEMP1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CEMP1 ELISA Kit，CEMP1，
血紅su氧合mei1(HO1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：HO1 ELISA Kit，HO1，
旋轉蛋白(RTTN)elisa檢測試劑盒 英文名稱：RTTN ELISA Kit，RTTN，
信號su6A(SEMA6A)elisa檢測試劑盒 英文名稱：SEMA6A ELISA Kit，SEMA6A，
α半乳糖mei(αGAL)elisa檢測試劑盒 英文名稱：αGAL ELISA Kit，αGAL，
P53(P53)elisa檢測試劑盒 英文名稱：P53 ELISA Kit，P53，
TAR DNA結合蛋白43(TARDBP/TDP43)elisa檢測試劑盒 英文名稱：TARDBP/TDP43 ELISA Kit，TARDBP/TDP43，
GDP解離抑制因子2(GdI2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：GdI2 ELISA Kit，GdI2，
CD68分子(CD68)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CD68 ELISA Kit，CD68，
B細胞活化因子(BAFF)elisa檢測試劑盒 英文名稱：BAFF ELISA Kit，BAFF，
Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PⅠCP ELISA Kit，PⅠCP，
25羥基維生suD2(25 HVD2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：25 HVD2 ELISA Kit，25 HVD2，
血小板內皮細胞粘附分子1(PECAM1)elisa檢測試劑盒 英文名稱：PECAM1 ELISA Kit，PECAM1，
次級淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CCL21 ELISA Kit，CCL21，
γ干擾su誘導單核細胞因子(MIG/CXCL9)elisa檢測試劑盒 英文名稱：MIG/CXCL9 ELISA Kit，MIG/CXCL9，
谷氨suan[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)elisa檢測試劑盒 英文名稱：NR-2 ELISA Kit，NR-2，
復合前列腺特異性抗原(CPSA)elisa檢測試劑盒 英文名稱：CPSA ELISA Kit，CPSA，
DAPI溶液(即用型)泰諾福韋標準品 規格:15mg 英文名稱：Tenofovir
鹽suan土霉su標準品 規格:200mg 英文名稱：Oxytetracycline Hydrochloride
小白菊內酯標準品 規格:25mg 英文名稱：Parthenolide
磷suan奧斯他韋標準品 規格:200mg 英文名稱：Oseltamivir Phosphate
lvben吩嗪標準品 規格:200mg 英文名稱：Clofazimine
5-fu胞嘧啶標準品 規格:200mg 英文名稱：Flucytosine
泰諾福韋酯富馬suan鹽標準品 規格:200mg 英文名稱：Tenofovir Disoproxil Fumarate
相關雜質B標準品 規格:25mg 英文名稱：Clonazepam Related Compound B
雙fu美松叔戊suan酯標準品 規格:200mg 英文名稱：Flumethasone Pivalate
度西汀相關物質H標準品 規格:ea 英文名稱：
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