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貨號 | FS-X9547 |
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操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Mitochondrial membrane potential assay kit with JC-1 | >100次 | FS-X9547 |
產品介紹:
本試劑盒是一種以JC-1為熒光探針,快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測。 JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質中,此時JC-1為單體(monomer),可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。 線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。 JC-1單體的大激發波長為514nm,大發射波長為529nm;JC-1聚合物(J-aggregates)的大激發波長為585nm,大發射波長為590nm。實際觀察時,使用常規的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。 本試劑盒提供了CCCP作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測100個樣品;對于12孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測200個樣品。 試劑盒組分: JC-1(200X)——————100μl/管,共5管 超純水————————90ml JC-1染色緩沖液(5X)——80ml CCCP(10mM)——————20μl 儲存條件:-20℃。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
煙酰an腺嘌呤二核suan(NAD)elisa檢測試劑盒 英文名稱:NAD ELISA Kit,NAD,
血清淀粉樣蛋白A(SAA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SAA ELISA Kit,SAA,
血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)elisa檢測試劑盒 英文名稱:VEGF-D ELISA Kit,VEGF-D,
胸腺表達趨化因子(TECK/CCL25)elisa檢測試劑盒 英文名稱:TECK/CCL25 ELISA Kit,TECK/CCL25,
銜接蛋白mei活化因子1(APAF1)elisa檢測試劑盒 英文名稱:APAF1 ELISA Kit,APAF1,
細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)elisa檢測試劑盒 英文名稱:SmIg ELISA Kit,SmIg,
胃蛋白mei原A(PG-A)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PG-A ELISA Kit,PG-A,
早期生長應答因子1(EGR1)檢測試劑盒 forEarlyGrowthResponseProtein1(EGR1)
成纖維細胞生長因子9(FGF9)檢測試劑盒 forFibroblastGrowthFactor9(FGF9)
Polycomb組環指蛋白4(PCGF4)檢測試劑盒 forPolycombGroupRingFingerProtein4(PCGF4)
中心體蛋白3(CETN3)檢測試劑盒 forCentrin3(CETN3)
白介su13(IL13)檢測試劑盒 forInterleukin13(IL13)
高遷移率族蛋白1(HMG1)檢測試劑盒 forHighMobilityGroupProtein1(HMG1)
白介su1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒 forInterleukin1ReceptorAntagonist(IL1RA)
mei原粒蛋白16同源物B(ZG16B)檢測試劑盒 forZymogenGranuleProtein16HomologB(ZG16B)
激肽釋放mei15(KLK15)檢測試劑盒 forKallikrein15(KLK15)
早期內體抗原1(EEA1)檢測試劑盒 forEarlyEndosomeAntigen1(EEA1)
線粒體膜電位檢測試劑盒喹那普利相關物質B標準品 規格:50mg 英文名稱:
萘法zuotong鹽suan鹽標準品 規格:200mg 英文名稱:Nefazodone Hydrochloride
鹽suan雷昔芬標準品 規格:200mg 英文名稱:Raloxifene Hydrochloride
鹽suan美加明標準品 規格:200mg 英文名稱:Mecamylamine Hydrochloride
zuo吡坦標準品 規格:10mg 英文名稱:Zolpidem CIV
鹽suan喹那普利標準品 規格:400mg 英文名稱:Quinapril Hydrochloride
氧fu沙星相關物質A標準品 規格:25mg 英文名稱:
氧fu沙星標準品 規格:200mg 英文名稱:Ofloxacin
更昔韋標準品 規格:200mg 英文名稱:Ganciclovir
2E, 4E-己二烯suan異丁酰an標準品 規格:25mg 英文名稱:
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