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剛果紅(β-淀粉樣蛋白染料)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 15:21:34瀏覽次數:205次

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貨號 FS-X9809
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產品介紹:

分子量:696.66

溶解性:溶于水

激發波長:497nm

儲存:-20℃,避光,有效期一年

中文名稱:剛果紅(β-淀粉樣蛋白染料)

英文名稱:

產品規格:10mg

貨號:FS-X9809

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;

5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

補體1抑制因子(C1INH)英文名:C1INH 9號染色體開放閱讀框86抗體包裝5g

補體1q(C1q)英文名:C1q 鈣粘附分子18抗體包裝25g

脫氫磷(PDP)英文名:PDP CD276抗體包裝5g

脫氫激同工4(PDK4)英文名:PDK4 21號染色體開放閱讀框25抗體包裝1g

脫氫β(PDHβ)英文名:PDHβ 22號染色體開放閱讀框36抗體包裝5g

脫氫α(PDHα)英文名:PDHα 補體組分1q子成分樣蛋白1抗體包裝1g

羧化(PC)英文名:PC CD44抗體包裝25g

糖磷異構1(TPI1)英文名:TPI1 9號染色體開放閱讀框114抗體包裝5g

別孕烯(AP)英文名:AP CD8β鏈(CD8-β)抗體包裝100mg

表皮轉谷酰胺(TGM3)英文名:TGM3 6號染色體開放閱讀框1抗體包裝25g

表皮調節(EREG)英文名:EREG γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體包裝5g

表皮生長因子受體2(EGFR2)英文名:EGFR2 9號染色體開放閱讀框72抗體包裝25g

表面活性物質關聯蛋白D(SPD)英文名:SPD 鈣粘附分子10抗體包裝5g

表面活性物質關聯蛋白A(SPA)英文名:SPA R Cadherin/CDH4包裝25g

表睪(ET)英文名:ET 大鼠細小病H-1株(H-1)抗體包裝5g

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>98%,BR幽門螺旋菌IgG試劑盒乙酰蝙蝠葛蘇林堿;O-diacetyld

大腸埃希菌Escherichia│coli 質量規格:分析標準品幽門螺旋桿菌IgM試劑盒一葉萩堿;Securinine

膠孢刺盤孢Colletotrichum│gloeosporioides 質量規格:>98%,BR硬骨試劑盒異葒草; Homoorientin
剛果紅(β-淀粉樣蛋白染料)纖維纖維微 甘銅風疹病抗體

冷溫木拉克酵母 硅四鈉鹽吸血蟲抗體

斯氏土地桿 2-甲基-1,3-苯并惡唑-6-羧CD34分子

大腸埃希氏 雙(4-基苯基)甲腫瘤干標記物

弗雷德里克斯堡假單胞 3-溴-2,6-二甲氧基吡啶Parkin蛋白

克魯斯假絲酵母 5''-溴-3,3''-二辛基-[2,2':5',2''-三噻吩]-5-甲維生B

小殼焦孢屬 羥鈷金黃色葡萄球腸B

釀酒酵母 3-氟-5-溴苯金黃色葡萄球腸C

釀酒酵母 棕櫚異辛酯金黃色葡萄球腸E

蠟狀芽孢桿 2,4-二煙前列腺H2

蘇云金芽孢桿 2-乙黃原基異丁超氧化物歧化

白僵 (1R,2R)-2-氨基環己鹽鹽二氫蝶啶還原

傳染性喉氣管炎病 (1S,2S)-2-氨基環己鹽鹽CD73分子

釀酒酵母 肉桂肟, mixed isomers7-脫氫膽固還原

矩圓黑盤孢 2-氨基-5-溴-4-甲基噻唑鹽鹽肝微粒體混合功能氧化

 


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