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| 貨號 | FS-X9814 |
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中文名稱：細胞骨架藍色熒光探針
英文名稱：
產品規格：200μL
貨號：FS-X9814
產品介紹:
本染料是F-肌動蛋白的高親和力探針，由蘑菇毒素制成，與藍色熒光染料偶聯。以納米摩爾濃度使用時，鬼筆毒素是方便的探針，可用于對固定和打孔的組織切片、細胞培養物或無細胞實驗體系中的F-肌動蛋白進行標記、鑒別和定量。 Ex/Em：350nm/450nm，比抗體染色更*。適合于固定和通透的樣本。 熒光標記的鬼筆環肽與肌動蛋白對于不同的物種，包括植物和動物具有幾乎相同的高結合屬性。鬼筆環肽結合具有高選擇性，而F-肌動蛋白紅色熒光。呈現出很少的非特異性染色。本產品可以用于熒光顯微鏡、微孔板、比色皿。 濃度：200U/mL儲存：-20℃，避光，有效期6個月。 |
培養操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養： 1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養； 5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜； 5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
白介15(IL15)英文名：IL15 1號染色體開放閱讀框103抗體包裝100g
白介13受體α2(IL13Rα2)英文名：IL13Rα2 兒茶酚O基移位抗體包裝25g
白介13(IL13)英文名：IL13 補體C1qTNF9鏈多肽抗體包裝5g
白介12B(IL12B)英文名：IL12B 平滑肌鈣調蛋白CNN2抗體包裝1g
白介12A(IL12A)英文名：IL12A 心肌病相關蛋白2包裝5g
白介11受體α(IL11Rα)英文名：IL11Rα 5號染色體開放閱讀框34抗體包裝100g
白介11(IL11)英文名：IL11 E1A激活基因激蛋白1抗體包裝25g
白介10(IL10)英文名：IL10 2號染色體開放閱讀框42抗體包裝5g
八聚體結合轉錄因子4(OCT4)英文名：OCT4 豬瘟病抗體包裝1g
酰tRNA合成復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)英文名：AIMP1 3號染色體開放閱讀框54抗體包裝5g
基己糖Bβ(HEXβ)英文名：HEXβ 2號染色體開放閱讀框43抗體包裝5g
基己糖Aα(HEXα)英文名：HEXα 豬瘟病抗體包裝5g
基端前心鈉肽(NT-ProANP)英文名：NT-ProANP 中心體蛋白110抗體包裝1g
基端前腦鈉(NT-ProBNP)英文名：NT-ProBNP 纖維包裝5g
阿黑皮原(POMC)英文名：POMC 分裂周期蛋白14B抗體包裝10ml
假單胞菌Pseudomonas│testosteroni 質量規格：>98.5%,BR,可用于培養異質性胞核核糖核蛋白M試劑盒鹽葫蘆巴堿;Trigonelline
Staphylococcus│aureus 質量規格：HPLC>97%,標準品異質性胞核核糖核蛋白L試劑盒鹽石蒜堿;Lycorine hydro
疣孢青霉Penicillium│verruculosum 質量規格：>98%,進分,sigma E1383 異質性胞核核糖核蛋白L試劑盒雅姆皂元 ;yamogenin
細胞骨架藍色熒光探針銹赤蠟黃鏈霉 1-芐氧羰基-3-羥基氮雜環丁烷喋呤抗體
慢生根瘤 2,4-二溴吡啶-3-甲胃動蛋白2抗體
釀酒酵母 3,4-雙(二氟甲氧基)苯甲Ⅱ型膠原α1
泡盛曲霉 6-溴-7-氟喹啉無翅型MMTV整合位點家族成員1
馬沙門氏 1-Boc-2-T因子
白黃馬賽 1-二茂鐵基乙尿肌酐
黃曲霉 2--4-甲氧基苯青霉
芽孢桿 N,N-雙(4-磺丁基)-3-鏈霉
布魯塞爾德克酵母 2-基-4-氟甲酯慶大霉
食有機物深海芽孢桿 6--1,8-二氮雜萘-2(1H)-酮相關抗原11A
卡門柏青霉 3-氟-4-溴溴芐肝吸蟲
Methylibium 基二茂鐵全反鈷II型
釀酒酵母 H-89 肝吸蟲IgM抗體
毛栓孔 1-甲基-1H-吡唑-4-肝吸蟲IgG抗體
類芽孢桿屬 1-N-芐氧羰基哌-2-甲甲酯抗磷脂A2受體IgG抗體
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