當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒(WST-8法)
貨號 | FS-X9530 |
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產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Cell Counting Kit-8 | 100次|500次|2500次|10000次 | FS-X9530 |
產品介紹:
本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應用于細胞增殖和細胞 毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。 WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成 橙黃色的formazan(參考下圖)。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關 系。 WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優點。首先,MTT 被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可 以省去后續的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩定,使實驗結果更加穩 定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。 WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩定。 本試劑盒可以用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒 性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。 本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無須再進行任何配制等操作 。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan。可以用于 大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。 WST-8對細胞無明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈 活,便于找到佳測定時間。 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
蛋白酶激活受體1(PAR1)檢測試劑盒 forProteaseActivatedReceptor1(PAR1)
腺苷脫氨酶(ADA)檢測試劑盒 forAdenosineDeaminase(ADA)
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測試劑盒 forNicotinamideAdenineDinucleotidePhosphateOxidase4(NOX4)
鈣離子轉運ATP酶A2(ATP2A2)檢測試劑盒 forATPase,Ca++Transporting,CardiacMuscle,SlowTwitch2(ATP2A2)
Dachsous1蛋白(DCHS1)檢測試劑盒 forDachsous1(DCHS1)
金屬硫蛋白1L(MT1L)檢測試劑盒 forMetallothionein1L(MT1L)
小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)檢測試劑盒 forSmallNuclearRibonucleoproteinPolypeptideD1(SNRPD1)
內分泌腺來源血管內皮生長因子(EG-VEGF)檢測試劑盒 forEndocrineGlandDerivedVascularEndothelialGrowthFactor(EG-VEGF)
補體受體4(CR4)檢測試劑盒 forComplementReceptor4(CR4)
AMPA離子能谷氨受體3(GRIA3)檢測試劑盒 forGlutamateReceptor,Ionotropic,AMPA3(GRIA3)
Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒 forTollLikeReceptor2(TLR2)
X-框結合蛋白1(XBP1)檢測試劑盒 forX-BoxBindingProtein1(XBP1)
Heterotaxy1蛋白(HTX1)檢測試劑盒 forHeterotaxy1(HTX1)
Ets變異體3(ETV3)檢測試劑盒 forEtsVariant3(ETV3)
白細胞激活黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒 forActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule(ALCAM)
Salusinβ蛋白(Salusinβ)檢測試劑盒 forSalusinBeta
絲蛋白Bβ(FLNβ)檢測試劑盒 forFilaminBBeta(FLNb)
CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒(WST-8法)釓噴酸單葡胺標準品 規格:500mg 英文名稱:Gadopentetate Monomeglumine
吩噻嗪標準品 規格:500mg 英文名稱:Phenothiazine
依莰舒三乙醇胺標準品 規格:200mg 英文名稱:Ecamsule Triethanolamine
依莰舒溶液標準品 規格:0.5ml 英文名稱:Ecamsule Solution
丙烯(E)-異構體標準品 規格:50mg 英文名稱:Cefprozil (E)-Isomer
東莨菪內酯標準品 規格:20mg 英文名稱:Scopoletin
5-硝基糠醛二乙酸酯標準品 規格:100mg 英文名稱:Nitrofurfural Diacetate
二環己基標準品 規格:2ml×2amplues 英文名稱:Dicyclohexyl
沙醇標準品 規格:200mg 英文名稱:Iodixanol
毛果蕓香堿標準品 規格:300mg 英文名稱:Pilocarpine
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
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