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貨號 | FS-X9955 |
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產品介紹:
用途: 網狀纖維染色,可區分膠原纖維 注意事項: 光易分解,使用前恢復至室溫,網狀纖維呈黑色 儲存條件:4℃,避光,3個月 |
中文名稱:Gordon-Sweets銀氨溶液
英文名稱:
產品規格:100ml
貨號:FS-X9955
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
暹羅盤孢冷誘導RNA結合蛋白抗體Human ENTPD4 兔子Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒
產朊假絲酵母連接相關蛋白1抗體Human ENOX2 兔子Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒
費希爾曲霉連接相關蛋白2抗體Human ENOX1 兔子Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒
成鏈需鹽桿菌 磷化周期依賴性激5抗體Human ENPP4 兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒
pACYC184異戊烯半胱羧基轉移抗體Human ENPP5 兔子Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫試劑盒
黃桿菌鳥核交換因子CLLD7抗體Human ELP4 兔子Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)免疫試劑盒
四川散斑殼趨化樣因子超家族成員4抗體Human EIF5A2(Eukaryotic translation initiation factor 5A-2) 兔子Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6)免疫試劑盒
繩索狀芽胞桿菌趨化樣因子超家族成員7抗體Human EIF5B 兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒
膠孢趨化樣因子超家族成員5抗體Human EMB 兔子Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌卷曲螺旋結構域蛋白64B抗體Human EIF6(Eukaryotic Translation Initiation Factor 6) 兔子Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)免疫試劑盒
釀酒酵母組蛋白H3-K9甲基轉移抗體Human ELMOD1 兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌趨化樣因子超家族成員6抗體Human ELMOD2 兔轉化生長因子β3(TGFB3)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母cornichon樣蛋白抗體Human EIF5A(Eukaryotic translation initiation factor 5A-1) 兔轉化生長因子β2(TGFβ2)免疫試劑盒
溜曲霉Ras激抑制因子連接增強蛋白1抗體Human EIF5 兔中性粒明膠相關脂質運載蛋白(NGAL)免疫試劑盒
棲藻海桿狀菌Ras激抑制因子連接增強蛋白2抗體Human ELOF1 兔脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒
西蕃蓮莖基腐病Ras激抑制因子連接增強蛋白3抗體Human EMB 兔載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質量規格:>50%,BSSpondin-2 毛萼結
百日咳博德特氏菌Bordetella│pertussis 質量規格:>98%,BRSPARC相關模塊化鈣結合蛋白2試劑盒莫諾宗
郎伍德鏈霉菌Streptomyces│longwoodensis 質量規格:>98%,BRSPARC相關模塊化鈣結合蛋白1試劑盒貓眼草黃
Gordon-Sweets銀氨溶液黑腐皮殼 磷苯基酯粘蛋白1抗體
長枝木霉 3′,4′-二苯乙酮脫脫嘧啶核內切1抗體
褐離褶傘 丁己酯博卡病IgG抗體
地生鱗傘 4-正戊基博卡病IgM抗體
釀酒酵母 (S)-(-)-1-苯基乙酮羧化
雙孢蘑菇 磺乙磷A1
錐形赤褶菇2-2 2-氨基-3-甲基-5-氟吡啶絡激受體-1
蒂蓋姆頭珠霉 環己溴氫鹽抗腦血管內皮抗體
豬丹絲 聚二環氧乙烷甲基肌酐
盤長孢狀盤孢 2,5-二氟苯磺酰煙曲霉IgG抗體
聚紅粉端孢霉 2-(2'-羥基-3',5'-二叔戊基苯基)苯并三唑鋅指蛋白20
淡紫褐鏈霉 5--3--2-羧肝
根瘤 1,2:5,6-雙鄰異亞基-alpha-D-異構呋喃糖鋅指蛋白288抗體
根瘤 苯胍鹽鹽抗人組織谷酰轉移分泌型IGA抗體
*冬蟲夏草 2,2-二甲基-5-(2,5-二氧基)戊胰彈力蛋白
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