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貨號 | FS-X9532 |
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產品介紹:
本試劑盒提供了一種經典而又快速簡便的細胞凋亡與細胞壞死檢測方法。染色快速方便,兩種染料的染色僅需20-30分鐘,一步染色即可完成。使用方便,使用流式細胞儀檢測時,無需稀釋等配制過程,也無需再準備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測100個樣品,每個樣品的細胞數量可以為10-100萬。 試劑盒組份: 細胞染色緩沖液———100ml Hoechst染色液———0.5ml PI染色液——————0.5ml 本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方法。細胞發生凋亡時,染色質會固縮。 Hoechst 33342可以穿透細胞膜,染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜,對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞,其細胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細胞為弱紅色熒光+弱藍色熒光,凋亡細胞為弱紅色熒光+強藍色熒光,壞死細胞為強紅色熒光+強藍色熒光。參考下圖,左圖為誘導凋亡前的正常細胞,右圖為誘導凋亡后的細胞。 儲存條件:-20℃避光,有效期一年。 |
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
Apoptosis and Necrosis Assay Kit | 100次 | FS-X9532 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒 forInterferonGamma(IFNg)
蛋白O-巖藻糖基轉移酶2(POFUT2)檢測試劑盒 forProteinO-Fucosyltransferase2(POFUT2)
核因子κB(NFκB)檢測試劑盒 forNuclearFactorKappaB(NFkB)
胰島素樣生長因子結合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒 forInsulinLikeGrowthFactorBindingProtein6(IGFBP6)
金屬硫蛋白1E(MT1E)檢測試劑盒 forMetallothionein1E(MT1E)
細胞周期素A1(CCNA1)檢測試劑盒 forCyclinA1(CCNA1)
蛋白激酶Cη(PKCη)檢測試劑盒 forProteinKinaseCEta(PKCh)
鈷胺傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)檢測試劑盒 forTranscobalaminII,MacrocyticAnemia(TCN2)
尿酸鹽轉運蛋白1(URAT1)檢測試劑盒 forUrateTransporter1(URAT1)
轉錄激活因子6(ATF6)檢測試劑盒 forActivatingTranscriptionFactor6(ATF6)
單核細胞趨化蛋白4(MCP4)檢測試劑盒 forMonocyteChemotacticProtein4(MCP4)
巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)檢測試劑盒 forMacrophageInflammatoryProtein3Alpha(MIP3a)
FK506結合蛋白樣蛋白(FKBPL)檢測試劑盒 forFK506BindingProteinLikeProtein(FKBPL)
環前列腺素受體(PTGIR)檢測試劑盒 forProstacyclinReceptor(PTGIR)
N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)檢測試劑盒 forCalciumChannel,VoltageDependent,N-Type,Alpha1BSubunit(CACNa1B)
八聚體結合轉錄因子2(OCT2)檢測試劑盒 forOctamerBindingTranscriptionFactor2(OCT2)
肌球蛋白ⅩⅧA(MYO18A)檢測試劑盒 forMyosinXVIIIA(MYO18A)
細胞凋亡與壞死檢測試劑盒羧甲基淀粉鈉標準品(B型) 規格:400mg 英文名稱:Sodium Starch Glycolate Type B
霉素-N-氧化物標準品 規格:15mg 英文名稱:Azithromycin N-Oxide
鄰苯二甲酸羥丙甲纖維素酯標準品 規格:100mg 英文名稱:Hypromellose Phthalate
占噸酮標準品 規格:100mg 英文名稱:Xanthone
標準品 規格:200mg 英文名稱:Bicalutamide
鹽酸萊克多巴胺標準品 規格:200mg 英文名稱:Ractopamine Hydrochloride
酮相關物質C標準品 規格:20mg 英文名稱:
提取物標準品 規格:500mg 英文名稱:Powdered Andrographis Extract
聚二甲基硅氧烷標準品 規格:500mg 英文名稱:Polydimethylsiloxane
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