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貨號 | FS-X9715 |
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產品介紹:
CFSE/PI 雙染細胞毒性檢測試劑盒是利用細胞熒光染料CFSE(CFDA-SE)和PI對細胞進行染色,利用CFSE標記靶細胞,PI標記死的靶細胞來區分不同的細胞,活的靶細胞成綠色,死的靶細胞成紅色和綠色,從而檢測細胞毒性作用。根據不同的實驗方案設計,可以用來檢測化合物的細胞毒性作用。也可以用來檢測殺傷性T 細胞或NK 細胞介導的細胞毒作用。 CFDA-SE 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料,可以標記活體細胞。CFDASE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料,可以結合細胞內的蛋白質。CFDASE在結構上將酚羥基部位改造成AM體,所以自身不發熒光,熒光背景低,脂溶性高,能夠輕易穿透細胞膜,進入細胞內的CFDASE的AM 部位能被細胞內酯酶水解生成CFSE,通過共價結合賴氨酸側鏈的氨基而摻入細胞內和細胞表面的蛋白,且結合后發出強的綠色熒光。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細胞內蛋白質的氨基部位結合,固定在細胞內,不會漏出細胞外。CFSE進入細胞后定位于細胞膜、細胞質和細胞核,在細胞核的熒光強。 CFSE毒性小,不影響細胞的增殖能力。此方法操作簡單,且不用放射性同位素,不存在安全隱患。可以更快速,更準確和更安全地得到想要的實驗數據。 CFSE/PI標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞毒性檢測。 CFSE標記細胞呈綠色熒光,熒光波長:λex=496 nm,λem=516 nm。流式檢測時的激發波長可以選擇488nm,此時的發射波長為516nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel。PI標記細胞呈紅色熒光,流式檢測時的激發波長可以選擇488nm,此時的發射波長為647nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL2 detection channel。 CFSE標記的細胞除了流式細胞儀檢測細胞毒性外,還可單染后用于細胞增殖檢測,或者用熒光酶標板定量活細胞數目,或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。 儲存條件:CFSE探針-20℃避光保存;溶解液-20℃保存;PI染色液2-8℃避光保存。 有效期:六個月。 |
產品屬性:
產品名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 產品貨號 |
500T | FS-X9715 |
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時即可,白細胞需要培養較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
睪(T)英文名:T 載脂蛋白C1抗體包裝1g
高鐵血紅蛋白(MHB)英文名:MHB 載脂蛋白C2抗體包裝5g
高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)英文名:HMGB-1 載脂蛋白L1抗體包裝1g
高遷移率族蛋白1(HMGB1)英文名:HMGB1 載脂蛋白L4抗體包裝5g
高敏三碘狀腺原(u-T3)英文名:u-T3 載脂蛋白L5抗體包裝100g
高敏狀腺(u-T4)英文名:u-T4 載脂蛋白M抗體包裝25g
高密度脂蛋白膽固(HDL-C)英文名:HDL-C 載脂蛋白O抗體包裝500g
高靈敏度促狀腺激(U-TSH)英文名:U-TSH β淀粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白1抗體包裝5g
高爾基蛋白73(GP-73)英文名:GP-73 共濟失調性眼球運動功能喪失相關蛋白AOA1抗體包裝1g
高半胱(Hcy)英文名:Hcy 三號染色體開放閱讀框抗體包裝1g
干燥綜合征抗原B(SSB)英文名:SSB 腺嘌呤磷核糖轉移抗體包裝1g
干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)英文名:SCF/MGF 磷化通道蛋白2抗體包裝25g
干擾誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)英文名:IP-10/CXCL10 ADP核糖基化因子1抗體包裝5g
干擾調節因子5(IRF5)英文名:IRF5 乙型肝炎病X相關蛋白2抗體包裝1g
肝脂(HL)英文名:HL ADP核糖基化因子5抗體包裝5g
溴區結構域相鄰鋅指蛋白1A抗體轉鐵蛋白(TRF)Biapenem is a carbapenem antibiotic with activity against both Gram-positive and
CFSE/PI雙染細胞毒性檢測試劑盒Marisediminicola 1,3-環辛二烯(含穩定劑叔丁基鄰苯二酚)含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5
新月彎孢 5,6-二氟-2-羧酸含IQ基元GTP激活蛋白1
Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum 5,6-二氟和肽
香菇 四金酸三水合物核苷酸還原M1
耐輻射奇球突變株 4-氨基乙酯核基質蛋白22
柱狀環傘(柳菇、茶新菇) 4-乙酸乙酯鹽酸鹽核基質結合區結合蛋白質1
高大毛殼 酸性紫49核仁
Achromobacter denitrificans (S)-5-甲基-2-惡唑烷酮核仁形成區嗜銀蛋白
米根霉 DL-炔基甘核糖核酸
嗜果刀孢 4-派啶乙酸甲酯核纖層蛋白A;C
暗產色鏈霉 1,2-環己基二甲酸二甲酯核心蛋白聚糖
鏈霉 2,4,5-三氟芐核因子E2相關因子2
大腸埃希氏桿 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB
蘇云金芽孢桿 2,4-二甲基肉桂酸核因子κB受體活化因子
蘋果黑腐皮殼 2-甲基-4-吡啶羧酸甲酯核因子κB受體活化因子配基
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