當前位置:上海撫生實業有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞組織染色>> 改良Gomori三色染色液
貨號 | FS-X9962 |
---|
產品介紹:
用途: 又稱MGT染色液。肌肉活檢,肌纖維呈青綠色,膠原纖維呈亮綠色,細胞核呈紫色,線粒體呈紅色。 注意事項: 新鮮材料盡快進行冰凍切片。Gomori染色液應冰箱內存放,超過有效期建議丟棄以保證染色鮮亮。分化時間應根據染液配制時間適當調整,時間越長,分化時間約短。 儲存條件:4℃,避光,6個月 |
中文名稱:改良Gomori三色染色液
英文名稱:
產品規格:4×50ml|4×100ml
貨號:FS-X9962
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
嗜芽孢桿菌趨化樣因子超家族成員2抗體Human DDX3(DEAD box protein 3, X-chromosomal) 兔阿霉(ADR)免疫試劑盒
白色茶樹菇胱硫γ裂解抗體Human ECM2 兔γ-谷酰轉移1(GGT1)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌囊性纖維化跨膜轉運調節因子抗體Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) 兔β內啡肽(β-EP)免疫試劑盒
猴頭菌—50043酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體Human E2F4 兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒
羅布里格小單孢菌CD40L抗體Human E2F7 兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒
曲霉α-s1酪蛋白抗體Human EDAR 兔P物質受體(SP-R)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌CIDEB抗體Human EDC3 兔p物質(SP)免疫試劑盒
大腸埃希菌高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體Human EDC4 兔p53(p53)免疫試劑盒
西西布哈加瓦氏菌信號轉導蛋白亞基7A抗體Human CXCL17 兔N端前腦鈉(NT-proBNP)免疫試劑盒
谷棒狀桿菌ATCC13032凋亡抑制因子抗體Human DEFB121 兔NADPH氧化1(NOX1)免疫試劑盒
根霉D型產氣莢膜梭菌抗體Human DNAJB11 兔C肽(C-Peptide)免疫試劑盒
慢生根瘤菌降鈣抗體Human CTRP6 兔CD8分子(CD8)免疫試劑盒
變異短波單胞菌20號染色體開放閱讀框14抗體Human DNAJB4 兔CD4分子(CD4)免疫試劑盒
多粘芽孢桿菌結締組織生長因子抗體Human Cyclin T1 兔Bcl-2相關X蛋白(BAX)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌性T抗原-4抗體Human DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) 兔ADAM金屬肽含血小板反應蛋白1型13(ADAMTS13)免疫試劑盒
黑曲霉降鈣受體抗體Human CYGB(Cytoglobin) 兔8-異構前列腺(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>96.5%,BRRho GDP解離抑制因子1試劑盒輪環藤寧
Clostridium cellulosiClostridium cellulosi 質量規格:>98%,BRREST協阻抑因子3試劑盒龍膽山
堅強芽胞桿菌Bacillus│firmus 質量規格:>98%,BRras同源物基因家族成員b試劑盒內酯
改良Gomori三色染色液麥芽糖假絲酵母 4-氮雜可溶性CD40分子
新月彎孢 Boc-5-氨基戊γ氨基丁受體
黃孢平革 2-乙酰基噻唑粘蛋白5B抗體
腐皮殼 磷一水合物磷二酯3A
弗雷德里克斯堡假單胞 耐曬猩紅RC鉤端螺旋體
不吸水鏈霉 九氟戊蘭尼堿受體3
寄生孢 D-谷二甲酯鹽鹽6磷葡萄糖
巨大曲霉 2-溴-5-甲酯5磷核酮糖
禾粘座孢霉(或禾漆斑) N,N-二異酰甲殼質蛋白40
鹽水鹽土生古 (R)-2-羥基-3-苯基甲酯氨基
豬丹絲 8-溴-1-辛烯嗜TI型病
栗疫 4-羥基苯頻哪酯阿拉伯糖
波恩佩島蒼黃色桿 D-2,4-二氨基丁ZDNA結合蛋白1
木霉 5--2-呋喃甲RAS癌基因家族
膠孢 異壬天門冬氨基轉移
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗證碼
以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。