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貨號 | FS-X9835 |
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培養操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
中文名稱:碘化丙啶
英文名稱:Propidium Iodide
產品規格:10mg|50mg|100mg
貨號:FS-X9835
產品介紹:
Propidium iodide是可用于細胞染色的紅色熒光染料。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! 號:25535-16-4 別名:PI 純度:98.0% 分子量:668.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養: 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養; 5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養; | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
尼達明英文名: Carisoprodol緊密連接蛋白8抗體包裝1g
司汀英文名: Carisoprodol磷化半胱蛋白9抗體包裝25g
考酚酯/霉酚酯英文名: Carvedilol磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g
美登DM1英文名: Carvedilol磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝2g
美英文名: Cediranib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g
立賓英文名: Celecoxib磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝5g
米替福新英文名: Celecoxib磷化p21蛋白抗體包裝1g
蒽醌英文名: Chlortetracycline HCl磷化p21蛋白抗體包裝5g
莫特塞尼英文名: Chlortetracycline HCl8號染色體開放閱讀框84抗體包裝1g
達鉑;順糖鉑英文名: Cilostazol磷化p21蛋白抗體包裝5g
奈拉濱英文名: Cilostazol磷化轉錄調節因子CEBP α 抗體包裝100g
尼羅替尼英文名: Cisplatin CLEC2D蛋白抗體包裝1g
帕唑帕尼英文名: Cisplatin 富含半胱與表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝5g
帕唑帕尼鹽鹽英文名: Cisplatin 醌氧化還原樣蛋白1抗體包裝100g
曲塞二鈉英文名: Cladribine銅代謝結構域蛋白9抗體包裝25g
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規格:>99%,BR,USP胰島樣生長因子結合蛋白1試劑盒鹽羅格列;Rosiglitazone
分枝枝頂孢Acremonium│furcatum 質量規格:HPLC>98%,標準品胰島樣生長因子2受體試劑盒鹽吡格列;Pioglitazone
泛菌屬Pantoea│sp. 質量規格:>850mcg/mg,BR胰島樣生長因子2試劑盒藥根堿;Jatrorrhizine
碘化丙啶枯草芽孢桿 2,5-二氟-3-血管非炎性蛋白2
新疆糖絲 4-氨基-2--3-氟CD36分子
球孢白僵 3-三氟甲基-1H-5-吡唑磷脂酰肌1磷
禽腺病 四-(4-甲氧基苯)乙烯磷脂酰肌二磷
白布勒擔孢酵母 (9-苯基-9H-咔唑-2-基)基質金屬蛋白抑制因子
粗柄白蘑 6-乙基吡啶-3-基質金屬蛋白
球孢白僵 3-溴-4-異硫基苯血清肌肽
巴達維亞芽孢桿 6-溴-5-甲基-1H-吲唑胱天蛋白12
大腸桿 2-氨基-5-溴吡啶-4-羧鈣調蛋白激4
鐮刀(三七根際土壤) Meso-四(3,5-二溴-4-羥基苯基)卟啉基質金屬蛋白6
魚肉中磺嘧啶、磺甲惡唑質控樣品 聚-L-精巨病PP65抗原
Rhizobiales sp. 萘磺鈉載脂蛋白B
尖孢鐮刀亞麻專化型 十七烷內聚合
植物內芽孢桿 DA201大孔樹脂神經生長因子受體
蘇云金芽胞桿庫爾斯塔克亞種 N-甲基氧基乙酯HIV (1+2) 抗原抗體
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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