今天，河南大學(xué)張亮同學(xué)向我司技術(shù)咨詢了ELISA試劑盒在包被中所需求的條件？這種問(wèn)題可能許多老師在試驗(yàn)檢測(cè)中也有所疑問(wèn)，對(duì)此，我司技術(shù)特別書(shū)面收拾說(shuō)包被及包被所需求的條件有哪些？方便往后客戶在遇到這類問(wèn)題可以及時(shí)的修正處理問(wèn)題。
ELISA試劑盒在檢測(cè)中有一個(gè)詞叫包被，我們生物界將抗原或抗體固定在進(jìn)程稱為包被(coating)。換言之，包被便是抗原或抗體結(jié)合到固相載體外表的進(jìn)程。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的作用力。
那么Elisa試劑盒包被中所需求的條件是什么呢？
包被用抗原或抗體的濃度，包被的溫度和時(shí)刻，包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特色和資料的性質(zhì)而選定。抗體和蛋白質(zhì)抗原一般選用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液，也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中參加包被液后，在4-8℃冰箱中放 置過(guò)一夜，37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有平等的包被作用。包被的*恰當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的改變，每批資料需經(jīng)過(guò)試驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度和諧選 定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
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