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elisa試劑盒質壁分離實驗技術原理

時間:2017/2/17閱讀:403
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elisa分析檢測試劑盒質壁分離實驗原理:當外界溶液濃度大于細胞液濃度時,根據擴散作用原理,水分子會由細胞液中滲出到外界溶液中,通過滲透作用失水;由于細胞壁和原生質層的伸縮性不同,細胞壁伸縮性較小,而原生質層伸縮性較大,從而使二者分開;反之,外界溶液濃度小于細胞液濃度,則細胞通過滲透作用吸水,分離后的質和壁又復原。
質壁分離實驗目的要求:1.初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法;2.理解植物細胞發生質壁分離和復原的原理。
重點難點:1.初步掌握植物細胞質壁分離和復原的實驗方法;2.臨時裝片的制作;3.低倍顯微鏡的使用。實驗器材:紫色洋蔥的鱗片葉、刀子、鑷子、滴管、載玻片、蓋玻片、吸水紙、顯微鏡;質量濃度為0.3g/mL的蔗糖溶液或質量分數為30%的蔗糖溶液、清水。
質壁分離 plasmolysis 把液泡發育良好的植物細胞浸在高滲溶液中時,原生質收縮而和細胞壁分離,此現象稱為質壁分離。由于細胞膜與液胞膜的半透性,在高滲液中細胞液脫水而膨壓下降,不久就呈現質壁分離的臨界狀態(此時膨壓為0)。若進一步脫水,原生質體收縮同細胞壁分離,當細胞液的滲透壓與外液相等時,便停止收縮。把此時所用的溶液稱為質壁分離液。作為分離液,細胞膜對其溶質必須具有半透性,分子量較大的非電解質(如糖)或溶解度高的中性鹽常被用作分離液。如用對細胞膜和細胞壁吸附力強的Ca2+作為分離液,則整個原生質體輪廓向內凹陷而引起凹形質壁分離。如果用吸附力弱的K 和Na 作為分離液,則向外凸出而出現凸形質壁分離,通常把細胞浸入分離液中就出現凹形分離,隨著時間推移則凹形部位減弱,zui后整個原生質體呈現凸形分離狀態,至此所需的時間稱為質壁分離時間。此外用K+ ,Na+ 、Li+,則細胞膜的透性增高,由于離子滲入細胞質的結果,細胞質膨脹而粘性減少,細胞壁與液胞被壓迫,而原生質集中于細胞分離的一端,有如著冠狀態,這種現象稱為冠狀質壁分離。elisa分析檢測試劑盒利用質壁分離,可以測出水與溶質的透性(原生質測定法),此外如把質壁分離的細胞壁切斷,可取出原生質體。
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