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elisa試劑盒
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小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)elisa試劑盒使用技術(shù)

時間:2017/3/8閱讀:299
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小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)elisa分析檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120pg/ml, 80pg/ml,40pg/ml,20pg/ml, 10pg/ml)。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)elisa分析檢測試劑盒標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
60802A-50    柱式細(xì)菌 DNAout    50 次
60801-30    柱式腐殖酸清除劑    30 次
60801-100    柱式腐殖酸清除劑    100 次
60707-50    細(xì)菌 DNAout    50 次
60707-250    細(xì)菌 DNAout    250 次
60706-30    一管式 DNA 膠回收試劑盒    30 次
60706-100    一管式 DNA 膠回收試劑盒    100 次
60705-500    一管式植物 DNAout    500 次
60705-50    一管式植物 DNAout    50 次
60704-100    RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5    100mL
60703-100    RNase-free 乙酸鈉 ,3M,pH 5.2    100mL
60702-100    RNase-free SDS 溶液 ,10%    100mL
60701-30    土壤 DNAout    30 次
60701-100    土壤 DNAout    100 次
elisa分析檢測試劑盒

 

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