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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>elisa分析檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)。
一:elisa分析檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
1.次做實(shí)驗(yàn)時(shí),建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量和加入CCK-8試劑后的培養(yǎng)時(shí)間。
2.接種時(shí)注意細(xì)胞懸液一定要混勻,以避免細(xì)胞沉淀下來(lái),導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不一致。
3.培養(yǎng)板周?chē)蝗着囵B(yǎng)液容易揮發(fā),為減少誤差,建議培養(yǎng)板周?chē)乃倪吤靠字患优囵B(yǎng)基。
4.建議采用多通道移液器,減少平行孔間的誤差,加CCK-8時(shí),建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基液面下加,容易產(chǎn)生氣泡,干擾OD值。
5.若細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),培養(yǎng)基顏色或PH發(fā)生變化,建議更換培養(yǎng)基后再加CCK-8,含有酚紅的培養(yǎng)基不影響測(cè)定。
6.CCK-8對(duì)細(xì)胞的毒性非常低,其他的實(shí)驗(yàn),例如中性紅法或結(jié)晶紫法 ,也可在CCK- 8法檢測(cè)完后繼續(xù)進(jìn)行。
7.可以使用大于600nm的波長(zhǎng),例如650nm,作為參考波長(zhǎng)進(jìn)行雙波長(zhǎng)測(cè)定,CCK-8在參比波長(zhǎng)處沒(méi)有吸光值,設(shè)定參比波長(zhǎng)的目的是為了去除由于樣品渾濁所帶來(lái)的吸收。
8.如果實(shí)驗(yàn)中待測(cè)物質(zhì)有氧化還原劑,在不含細(xì)胞的培養(yǎng)基中加入藥物,然后加入CCK- 8試劑在一定時(shí)間內(nèi)檢測(cè),和不加藥物的培養(yǎng)基進(jìn)行比較(只加CCK-8試劑),如果O.D值明顯偏高,則說(shuō)明有反應(yīng)。
9.加CCK-8試劑時(shí)速度要快,減少試劑在移液器上的殘留,加入CCK-8試劑后輕輕震培養(yǎng)板,為了避免加樣時(shí)由于CCK-8殘留在槍頭上所帶來(lái)的誤差,可以在加樣前用培養(yǎng)稀釋CCK-8試劑并混勻后加樣。
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