當前位置:上海邦景實業有限公司>>技術文章>>?細胞STR鑒定方法
要求能提供細胞的一般和特殊的生物學性狀指標。一般特性指標包括:細胞的一般形態、特異性結構、細胞生長曲線和分裂指數、倍增時間、接種率、染色體分析、同工酶檢查、DNA指紋圖譜等。特異性指標常依據細胞種類和功能的特異性進行鑒定,比如,若為腺細胞則一般鑒定是否有特殊產物包括分泌蛋白或激素產生;若為腫瘤細胞,還應能夠證明細胞確系來源于腫瘤組織而非其它,并仍保留有腫瘤組織的特性,為此常需做集落形成實驗、裸鼠致瘤實驗以及對正常組織的侵襲實驗等。
一、對正常細胞系的鑒定
對正常細胞系的鑒定主要圍繞以下四個方面進行:
(1)鑒定細胞的種系來源:常用方法主要有染色體分析、同工酶分析、DNA指紋圖譜等技術。(2)鑒定細胞的組織來源:可通過形態學手段、檢測組織特異性抗原等進行鑒定。
(3)細胞是否發生轉化和惡變:主要通過核型分析、細胞生長行為觀察(是否喪失接觸抑制)、裸鼠成瘤實驗等進行鑒定。
(4)細胞有無發生交叉污染,主要通過同工酶及DNA指紋圖譜技術進行鑒定。
二、對腫瘤細胞系的鑒定
對腫瘤細胞系的鑒定主要圍繞其惡型性展開,染色體的異常、接觸抑制和密度依賴生長特性的改變、集落形成能力、裸鼠成瘤、動物體內的侵襲生長,以及某些基因、分子水平的特征均是腫瘤細胞鑒定的方向。
細胞STR鑒定的意義:
由于細胞培養體系在生物藥物的研究和技術發展中非常重要,適當的細胞系鑒定過程即成為每個研究人員的大興趣點。然而,交叉污染的問題仍然存在。隨著世界范圍內實驗室使用新細胞系的數量增多和頻率增加,在質量控制(如:細胞系鑒定)的基本原則上產生了巨大的差別。從已經發表的、使用"錯誤"的細胞系而導致可疑性結果的研究論文,到用于臨床的干細胞系和其它細胞系,交叉污染影響到了科學研究的每個領域-從實驗臺到臨床。如果在細胞培養的處理和操作中不進行重大變革,那么交叉污染將會成為一個更大、更嚴重的問題。
細胞培養體系在生物研究和藥物研究發展中非常重要,隨著研究的深入,細胞系的種類也逐漸增多,而細胞系的交叉污染仍然存在。交叉污染給實驗研究帶來了很嚴重的問題,如果使用了錯誤的細胞系使研究的結果遭到質疑,前期的實驗可能都要重新來做。因此對細胞系的認證是有必要的
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