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大鼠轉谷氨酰胺酶2C多肽ELISA檢測試劑盒使用說明書

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大鼠轉谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測試劑盒
需要而未提供的試劑和器材
37℃恒溫箱
標準規格酶標儀
精密移液器及一次性吸頭
蒸餾水
一次性試管
吸水紙
操作步驟
標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為240 pg/ml,160 pg/ml,80 pg/ml,40 pg/ml,20 pg/ml)。
加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
大鼠轉谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測試劑盒測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
DEAE 葡聚糖    10g    
DEAE 葡聚糖凝膠 A-25    25g    蛋白酶抑制劑混合液
DEAE 葡聚糖凝膠 A-50    25g    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 1
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B    25mL    蛋白磷酸酶抑制劑混合液 2
快流速 DEAE- 瓊脂糖凝膠    25mL    細菌蛋白酶抑制劑
脫氧膽酸    10g    哺乳動物蛋白酶抑制劑
脫氧膽酸鈉    10g    植物蛋白酶抑制劑
小牛胸腺 DNA    50mg    酵母蛋白酶抑制劑
鮭魚精 DNA    100mg    His 標簽蛋白蛋白酶抑制劑
脫氧核糖核酸酶 ( 牛胰 )    25mg    組織培養基蛋白酶抑制劑
焦碳酸二乙酯    10mL    α2巨球蛋白
地塞米松    100mg    AEBSF 溶液,10mg/mL
藍色葡聚糖 2000    1g    抗凝血酶Ⅲ,10mg/mL
硫酸葡聚糖    10g    APMSF 溶液,10mg/mL

大鼠轉谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)ELISA檢測試劑盒

 

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