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α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-08-17 14:34:18瀏覽次數:114次

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貨號 BJ-01611140-1
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒微量法公司正在出售的產品:整合suα1抗體Beta-Amyloid (1-42) β樣肽(1-42)(多肽蛋白)
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特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611140-1

商品介紹:

測定意義

α-KGDH(EC 1.2.4.2)廣泛存在于動物、植物微生物和培養細胞的線粒體中,是三羧酸循環調控關鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰fu酶A。

測定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和fu酶A生成琥珀酰fu酶A、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

粘著斑激酶抗原淡黃青霉豬磷脂酶B(PLB)elisa定量檢測試劑盒

磷酸化粘著斑激酶抗原槐栓菌猴過氧化物酶體增殖物激活受體δ( PPAR-δ)elisa定量檢測試劑盒

磷酸化粘著斑激酶抗原枯草芽胞桿菌豬微粒體谷胱S轉移酶1(MGST1)elisa定量檢測試劑盒

Fas活化的絲/蘇an酸激酶抗原芽孢桿菌豬生長調節致癌基因γ(GROγ)elisa定量檢測試劑盒

原纖維蛋白1抗原維多利亞維希尼克氏酵母豬中性粒性磷酸酶(NAP)elisa定量檢測試劑盒

纖維母生長因子4抗原微小鏈霉菌豬黑色su瘤關聯硫酸軟骨su蛋白聚糖(MCSP)elisa定量檢測試劑盒

纖維母生長因子5抗原細小磚紅鐮孢菌豬四旋蛋白30 (TSPAN30)elisa定量檢測試劑盒

衰老關鍵蛋白抗原沼澤類芽孢桿菌豬降鈣su基因相關肽(CGRP)elisa定量檢測試劑盒

FosB抗原不動桿菌豬神經鈣黏蛋白(NCAD)elisa定量檢測試劑盒

FOS樣抗原2黃曲霉猴增殖相關蛋白2G4 (PA2G4)elisa定量檢測試劑盒

叉頭蛋白F1抗原大腸埃希氏菌猴殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)elisa定量檢測試劑盒

插頭蛋白J1抗原釀酒酵母豬前列腺suE合酶2(PTGES2)elisa定量檢測試劑盒

FoxP1(T轉錄因子)抗原香菇豬非受體酪an酸激酶2(TNK2)elisa定量檢測試劑盒

插頭蛋白M1抗原大腸埃希氏菌豬T特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)elisa定量檢測試劑盒

麻疹病抗原(麻疹病融合蛋白)英諾克李斯特氏菌豬內凝集蛋白1(ITLN1)elisa定量檢測試劑盒
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒微量法外基質金屬蛋白mei誘導因子(EMMPRIN/CD147)試劑盒Anti-LIMK1 Antibody線粒體脫偶連蛋白3

垂體腺苷酸環化酶激活肽受體 (PACAPR)試劑盒Anti-LIF Antibody(PB0067)UBX結構域域蛋白D2

成骨生長肽(OGP)試劑盒 Anti-LMAN1 Antibody泛su硫酯酶L3

功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒 Anti-LIN28A Antibody泛su硫酯酶L1+3

磷脂酶C(PLC)試劑盒 Anti-LIPC Antibody人狀瘤病E6相關蛋白

血漿抗凝蛋白S(PS)試劑盒  Anti-LMNB2 Antibody泛su蛋白連接酶Q1

核因子-κB亞基p65(NF-κB p65)試劑盒Anti-LMO1 Antibody泛su蛋白連接酶U   

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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