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貨號 | BJ-016112-1 |
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產品簡介:
產品名稱:NAD激酶(NADK)測試盒微量法
規格:100管/48樣
貨號:BJ-016112-1
檢測方法:微量法
產品分類:輔酶Ⅰ系列
貯存溫度:2~8℃。
本試劑盒保質期:6個月
商品介紹:
測定意義: NADK(EC 2.7.1.23)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是目前所發現的生物體內惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶,可催化NAD(H)以ATP或無機多聚磷酸[poly(P)]作為磷酰基供體進行磷酸化反應,生成NADP(H)。因此,NAD激酶在合成NADP(H)以及調節NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。 測定原理: NADK催化NAD+磷酸化,生成NADP+;NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH;NADPH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT),通過在600 nm下測定MTT的還原速度(吸光值的變化)可反映出NADK活性的大小。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計/酶標儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。 |
操作步驟:
本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
磷酸化血管生成素受體2抗體大腸埃希氏菌O抗原微量凝集定型血清診斷液NCI-H2087(人非小肺腺癌)
氨酸激酶受體A抗體大腸桿菌KATO III(人胃癌)
促甲狀腺素釋放激素抗體人參土成對桿菌IAR20(大鼠肝)
端粒酶逆轉錄酶抗體白色金針菇HPAC(人胰腺腺泡上皮癌)
甲狀腺激素反應蛋白抗體孟氏假單胞菌HFT-8810(人胎兒胸腺株)
跨膜蛋白49抗體大腸埃希菌BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮)
腫瘤蛋白D54蛋白抗體傷寒沙菌SH-SY5Y(人神經母瘤)
四環素抗體微小桿菌J774A.1(小鼠單核巨噬)
腫瘤壞死因子-α/TNFα抗體串珠鐮孢G-401(人腎癌Wilms)
踝蛋白抗體交替紅色桿菌屬PA319(人大腸癌)
磷酸化踝蛋白抗體矮被孢霉Vero(非洲綠猴腎)
驅動蛋白結合蛋白1抗體金耳K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨)
瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體釀酒酵母BC3H1(小鼠腦瘤)
磷酸化微管相關蛋白抗體豇豆慢生根瘤菌293E(人胚腎(EBNA1基因修飾))
四分子交聯體5抗體藤倉鐮孢VE(人血管內皮)
NAD激酶(NADK)測試盒微量法擴張性共濟失調突變因子(ATM)試劑盒 Anti-CFB Antibody三磷酸腺苷受體受體P2X1
軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)試劑盒Anti-CFD Antibody三磷酸腺苷受體P2X5
抗心磷脂IgA(ACA-IgA)試劑盒 Anti-CFD Antibody三磷酸腺苷受體P2X5b
轉錄激活因子-4(ATF-4)試劑盒 Anti-CFL1 Antibody三磷酸腺苷受體P2X6
去唾液酸糖蛋白受體2(ASGR2)試劑盒Anti-CFD Antibody突觸富含酸膜蛋白7
多效生長因子(PTN)試劑盒Anti-CFI Antibody過氧化物酶體生成蛋白5相關蛋白
延伸蛋白A(EloA)試劑盒 Anti-CFL1 Antibody(PB0035)G蛋白偶聯嘌呤受體p2y6
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
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