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α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)紫外分光光度法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-08-17 15:04:17瀏覽次數:138次

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貨號 BJ-01611140-2
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒紫外分光光度法公司正在銷售的產品:雞傳染性法氏囊病病抗體APP695-770/APP17肽 (Amyloid protein precursor) 樣肽前體蛋白(17肽抗原)
白介su-17抗體Neuroprotective peptide/Gly-HN(Nuclear-encoded Humanin [HN(N)] Gly14) 神經保護肽
金雀花:

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒紫外分光光度法

紫外分光光度法

50管/48樣

BJ-01611140-2

商品介紹:

測定意義α-KGDH(EC 1.2.4.2)廣泛存在于動物、植物微生物和培養細胞的線粒體中,是三羧酸循環調控關鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰fu酶A。測定原理α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和fu酶A生成琥珀酰fu酶A、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。需自備的儀器和用品紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

促卵泡激su受體抗原相思根瘤菌豬特異性巨噬武裝因子(SMAF)elisa定量檢測試劑盒

促卵泡激su抗原美澳型核果褐腐病菌豬促生長激su釋放激su(GHRH)elisa定量檢測試劑盒

γ1氨基丁酸A型受體α1抗原凱斯特鞘氨單胞菌猴白介su11(IL-11)elisa定量檢測試劑盒

g-氨基丁酸B1受體(多肽)山藥枯萎病猴血管生成su樣蛋白2(ANGPTL2)elisa定量檢測試劑盒

γ1氨基丁酸A型受體B2抗原HIV假病 18A-41猴生長激su受體(GHR)elisa定量檢測試劑盒

谷an酸脫羧酶-67抗原短波單胞菌屬猴S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)elisa定量檢測試劑盒

生長抑制DNA損傷基因153抗原明尼蘇達被毛孢豬抗中性粒彈性蛋白mei抗體(ANEA)elisa定量檢測試劑盒

磷酸化神經生長相關蛋白43抗原美澳型核果褐腐病菌豬血管活性肽酶抑制劑(VPI)elisa定量檢測試劑盒

3-磷酸甘油脫氫酶(人)抗原馬腺疫鏈球菌獸疫亞種豬核孔蛋白133kda(NUP133)elisa定量檢測試劑盒

表面趨化因子受體3抗原纖細正青霉豬骨橋su(OPN)elisa定量檢測試劑盒

GATA結合蛋白3抗原紡織品 特種動物纖維含量 (毛與山羊絨)猴微精蛋白β(MSMβ)elisa定量檢測試劑盒

GATA結合蛋白4抗原立形乳桿菌猴蕈型乙酰受體(M-AChR)elisa定量檢測試劑盒

生長終止特異性同源盒基因抗原蘋果黑腐皮殼菌猴促胰液su/分泌su受體(SCTR)elisa定量檢測試劑盒

生長分化因子8抗原木耳987豬核孔蛋白50kda(NUP50)elisa定量檢測試劑盒

膠質源性神經營養因子抗原青霉屬豬巨噬清道夫受體1 (MSR1)elisa定量檢測試劑盒
α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)測試盒紫外分光光度法血管生成su樣蛋白4(ANGPTL4)試劑盒  Anti-LMO2 Antibody泛su載體蛋白L6

去唾液酸糖蛋白受體1(ASGR1)試劑盒Anti-LONP1 Antibody泛su激活酶2H

磷脂酰絲an酸(PS)試劑盒Anti-LMTK3 Antibody泛su蛋白連接酶G1

α肌動蛋白(α Actin)試劑盒 Anti-LOC134147/CMBL Antibody泛su蛋白連接酶E1

酪an酸蛋白激酶受體A2(EphA2)試劑盒Anti-LOC134147/CMBL Antibody泛su蛋白連接酶E3

周期su依賴性激酶抑制因子2A(CDKN2A)試劑盒 Anti-LOX Antibody泛su蛋白連接酶2E2

骨成型蛋白15(BMP-15)試劑盒 Anti-LOXL2 Antibody泛su蛋白連接酶D4   

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后


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