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細胞培養的優點:
1.研究的對象是活細胞
產品僅用于科研在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備
記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應用的學科領域較為寬廣,如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等;
適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進行有針對性的研究。
6.研究的費用相對較經濟
可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象
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公司產品僅用于科研
產品名稱:EBV 轉化的絨猴白細胞
產品英文代號:B95-8
細胞培養條件:1640+10%FBS+1%P/S
生長狀態:懸浮生長
產品規格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養溫度(℃):37
運輸溫度(℃):常溫
運費基數:活細胞包郵/凍存100-400元干冰費
穩定貨期(是or否): 是
產品名稱 | |
規格 | 1×106 |
貨號 | BJX6710 |
細胞培養及傳代:
<1>細胞培養
產品僅用于科研細胞請于細胞培養箱中培養,大部分細胞是37℃,5% CO2,濕度環境下培養的。有極少部分細胞培養條件不行,請仔細閱讀相應的細胞說明書,使用正確的培養基及培養條件;
細胞于培養瓶或皿中培養,加入適量說明書上標注的細胞相應*培養基(一般液面高度2-3mm即可)。
<2>細胞傳代(以下步驟適用于10cm皿)
細胞培養至密度達80%以上時即可傳代,先將細胞培養基取出3mL用15mL離心管裝好,其他培養基全部吸干舍棄;
培養皿加入2-3mL無菌PBS,輕輕晃動皿,使PBS浸洗到皿底所有部位,PBS吸干舍棄;
加入1mL胰酶,輕輕晃動皿,使胰酶浸沒到皿底所有部位,將皿蓋好放入培養箱中消化;
3min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞不再貼壁,即可加入*步收集的培養基混勻;
若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至不貼壁為止;
將細胞懸液均勻分成幾份,分別加入不同培養皿中,補加新培養基后放回培養箱培養。
<3>相關問題
部分細胞在傳代后時,會有以下現象:細胞內會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養基漂浮一些死細胞或者細胞長的極慢。出現以上現象時,可以咨詢本公司技術人員此現象是否正常及相關處理方式,不要頻繁換液,大多數細胞1周換液2-3次即可。
細胞碎片較多、背景較臟時,貼壁細胞用PBS漂洗兩次、懸浮細胞打散后低速離心(900rpm,3min)能有效改善。
傳代比例建議1:2-1:3,長得比較快的細胞可以1:3,比較慢的按1:2傳代。傳代后,建議不要使用傳代前培養所使用的培養基,會有大量細胞碎片甚至導致細胞死亡的風險。
細胞狀態不好或者生長極慢的時候,可以通過增加血清濃度調整細胞狀態及生長速度。
請不要隨意更換培養基,因實驗需要,可以逐步馴化。
懸浮傳代:混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用*培養基重懸接種到新的培養皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗一次。 ?
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。明舟生物按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
復蘇細胞步驟: 將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
微管關聯蛋白4(MAP4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 斐濟球腔菌 1g
雙特異性磷酸酶1(DUSP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 鼠李糖乳桿菌 5g
細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98%(~25%water) 紅色紅曲 25g
細胞色素P450家族成員3A4(CYP3A4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98%(~25%water) 阿穆爾斯克灣鹽地桿菌 5g
δ樣蛋白4(δLL4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 柴油食烷菌 100mg
T-框蛋白3(TBX3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 金孢霉屬 1g
胃脂酶(LIPF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 淺紫灰直絲鏈霉菌 1g
粘蛋白2(MUC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌枯草亞種 25g
纖維蛋白原β(FGβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 木霉 5g
非神經元性烯醇化酶(NNE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 壁節桿菌 100g
Ⅱ型膠原α1(COL2α1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 展示接霉 25g
C-Mer原癌基因酪氨酸激酶(MERTK)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 90% 彩色豆馬勃 100ml
Janus激酶3(JAK3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 90% 谷氨酸棒桿菌 500ml
纖維蛋白原γ(FGγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ≥98% 蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種 500mg
前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(PCSK9)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ≥98% 平菇(雪蓮菇) 5MG
心型脂肪酸結合蛋白(FABP3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 乳桿菌屬 1g
三碘甲狀腺原氨酸(T3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 梅林青霉 5g
補體成分4b(C4b)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 副豬嗜血桿菌 1g
EBV轉化的絨猴白細胞價格人腦膜Human Brain: Normal Brain Meninges CellsDerivatives人腦膜細胞分離自正常人腦膜組織,主要功能:(1)腦膜細胞圍繞著大腦,參與中樞神經系統的正常發育。(2)細胞能穩定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒Progesterone Receptor A/B (C89F7) Rabbit mAb100 ul
人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) Antibody100 ul
人水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAb100 ul
人抑肽酶(AP)ELISA試劑盒Progesterone Receptor B (C1A2) Rabbit mAb100 ul
人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒IFN-γ (3F1E3) Mouse mAb100 ul
人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒 Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) Antibody100 ul
人凋亡誘導因子(AIF)ELISA試劑盒PDGF Receptor β Antibody100 ul
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒PDGF Receptor α Antibody100 ul
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