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糖霉菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-22 14:47:02瀏覽次數:196次

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糖霉菌保存低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規格參數:
資源名稱  糖霉菌保存
種屬: Glycomyces│sp.

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養基: 12

生長條件: 28℃

存儲條件: 真空冷凍干燥法

?
儀器設備與器具:
1 恒溫培養箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養方法:
培養基 乳酸菌培養基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養基充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。
葡萄球菌選擇性瓊脂價格英文:Staphylococcus Selective Agar  產品規格:250g  產品用途:用于凝固酶陽性葡萄球菌的選擇性分離培養  

10%胰酪胨大豆肉湯*英文:10% NaCl Tryptic Soy Broth  產品規格:250g  產品用途:用于金黃色葡萄球菌的MPN測定,增菌培養(GB標準)  

營養瓊脂斜面價格英文:Nutrient agar slant  產品規格:250g  產品用途:用于細菌的純化培養  

豆粉瓊脂說明書英文:Blood Agar Base  產品規格:250g  產品用途:用于配制血平板  

磷酸鹽緩沖液(pH7.2)說明書英文:PBS broth  產品規格:250g  產品用途:用于樣品的稀釋  

含225ml7.5%肉湯均質袋供應英文:產品規格:10個/包  產品用途:用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養  

革蘭氏染色液供應英文:Gram Staining  產品規格:5ml*8  產品用途:用于細菌的革蘭氏染色試驗  

腦心浸液肉湯價格英文:Brain Heart Infusion Broth  產品規格:250g  產品用途:營養豐富,用于培養各種細菌  

甲苯胺藍-DNA酶平板*英文:產品規格:9cm  產品用途:用于金黃色葡萄球菌核糖酸酶檢測  

腦心浸出液肉湯(BHI)GB標準*英文:Brain Heart Influsion Broth  產品規格:250g  產品用途:用于金黃色葡萄球菌的純化培養  

腸毒素產毒培養基(不含瓊脂)供應英文:Enterotoxin Toxigenic Medium  產品規格:250g  產品用途:用于金黃色葡萄球菌腸毒素產毒試驗  

大鼠轉化生長因子β2elisa檢測試劑盒

英文名稱:Rat TGF-β-2 ELISA KIT

反應性:Rat

樣品類型:Serum, plasma, Cell culture supernatant

靈敏度:4 pg/ml

檢測目標:TGF-β-2

應用:Sandwich ELISA
棒桿菌屬 Corynebacterium sp.

乳酸片球菌 PediococcusacidilacticiLindner

膠凍樣類芽孢桿菌 Paenibacillus mucilaginosus

腸產毒性大腸埃希氏菌 Escherichia coli ETEC

腸致病性大腸埃希氏菌 Escherichia coli EPEC

英諾克李斯特氏菌 Listeria innocua

馬紅球菌 Rhodococcus equi

納豆芽孢桿菌 Bacillus natto

腸侵襲性大腸埃希氏菌 Escherichia coli EIEC

伊氏李斯特氏菌 Listeria ivanovii

山梨醇麥康凱瓊平板10塊Sorbitol Maconkey Agar Plate

麥康凱瓊平板50塊MacC Agar Plate大腸菌群及大腸桿菌分離

雙洗瓊平板10塊雙洗瓊平板

V-P試劑盒(、抗性染液)10毫升×2V-P Reagent(A、B)細菌V-P試驗

500毫升×4

結核冷染液70毫升×3結核冷染液

選擇性巧克力平板10塊Selectivity chocolate Plate

改良淋病奈瑟菌選擇性瓊平板10塊改良淋病奈瑟菌選擇性瓊平板

革蘭氏染液(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)/Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)50毫升×4Gram Stain Solution(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)細菌革蘭氏染色

250毫升×4

Fraser添加劑10毫升Fraser Supplement添加到HB4193中,用于李氏菌的選擇性增菌培養

UVM添加劑10毫升UVM Supplement添加到HB4195中,用于李氏菌的選擇性增菌培養
糖霉菌保存通用轉錄因子IIA樣因子抗體1-Hydroxy-N-methylacridone中文名:1-羥基-N-甲基吖啶酮別名:1-Hydroxy-10-methylacridone分子式:C14H11NO2

激活素受體1B抗體Epicorynoxidine中文名:別名:分子式:C21H25NO5

錨蛋白重復結構域蛋白42抗體Nicotine 1'-N-oxide中文名:別名:(S,S)-Nicotine 1'-N-oxide; Oxynicotine分子式:C10H14N2O

胞環蛋白肌動蛋白結合蛋白抗體6α-Hydroxylycopodine中文名:6α-羥基石松堿別名:Alkaloid L.20分子式:C16H25NO2

載脂蛋白A1抗體Anatabine中文名:新煙草堿別名:(S)-Anatabine分子式:C10H12N2
微生物培養方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養過程復雜,對平板的要求比較高,產品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養基將蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿,輕輕搖動培養皿,使培養基溶液均勻分布在培養皿底部,待培養基溶液凝固后即得平板培養基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。

 

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