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嗜堿假單胞菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-11-30 12:51:56瀏覽次數(shù):153次

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嗜堿假單胞菌保存低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
規(guī)格參數(shù):
資源名稱  嗜堿假單胞菌保存
種屬: Pseudomonas│alcalophila

分離基物: 土壤

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0002

生長條件: 28℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
產(chǎn)品僅用于科研生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體,產(chǎn)品僅用于科研具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時,菌種是指細(xì)菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。
Chinese Mitten Crabs Trembling Disease Virus河蟹顫抖病病毒RT-LAMP試劑盒英文名稱:Caspase-3 Activity colorimetric assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格:20T|50T|100T

發(fā)貨周期:1~3天

本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細(xì)胞caspase-3活性。測定原理基于Caspase-3特異水解多肽底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide(Ac-DEVD-pNA),釋放硝基pNA。游離硝基pNA呈黃色在405nm具有大吸收峰,用普通可見光分光光度比色方法測定。根據(jù)pNA標(biāo)準(zhǔn)管吸光度OD值和標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算來自底物肽釋放的pNA濃度,得到Caspase-3水解活性。

Caspase-3是凋亡過程中主要的終末剪切酶,因而也是研究多的caspase,它激活pro-caspase-2,6,7,9等,特異水解多種凋亡關(guān)鍵蛋白如PARP,介導(dǎo)細(xì)胞核染色質(zhì)固縮、凋亡小體生成、核DNA斷裂。

運(yùn)輸及保存:試劑常溫運(yùn)輸。到達(dá)后按要求儲存,1年內(nèi)穩(wěn)定。

所需儀器:酶標(biāo)儀與96孔酶標(biāo)板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。

工作波長:大吸收波長405nm,如不具備也可在400~450nm范圍內(nèi)測定,但靈敏度略降。

4-基甲 Human Inhibin A ELISA Kit純度:>95%

醋香葉酯Human Oncostatin M,OSM ELISA KIT純度:>95%

甘草單銨Human acetylcholine receptor antibody ELISA Kit純度:>90%

去甲駱駝蓬堿Human acetylcholine ELISA Kit純度:>95%

N-(2-甲基基)-4,5-癸二酰Human Glp-1 Elisa Kit純度:>95%

異子香Human Amylin ELISA Kit純度:>95%

異香Human Proinsulin ELISA Kit純度:>95%

Rat mammary carcima Marker-CA153 ELISA Kit大鼠腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T121469-200501TLC法鑒別飛龍掌血葉規(guī)格:1.0g

Rat Gastrointestinalcancer Marker-CA199 ELISA Kit大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T121470-200401TLC法鑒別朱砂根規(guī)格:1.0g

Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121471-200401TLC法鑒別桃金娘果規(guī)格:2.0g

Rat Phospholipidase A2,PL-A2 ELISA Kit大鼠磷酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒*規(guī)格:96T/48T121472-TLC法鑒別豨薟草規(guī)格:2.0g

Rat Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISA Kit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒進(jìn)口/分裝規(guī)格:96T/48T121473-200401TLC法鑒別籬欄網(wǎng)規(guī)格:2.5g

Rat Aquaporin 5,AQP-5 ELISA Kit大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒進(jìn)口/原裝規(guī)格:96T/48T121474-200401TLC法鑒別金果欖規(guī)格:0.1g
嗜堿假單胞菌保存組織脂質(zhì)比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織脂酰輔酶A脫氫酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)總活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織脂酰輔酶A合成酶(ACYL COA SYNTHETASE)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織脂肪酸合成酶(fatty acid synthase)活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織脂蛋白脂酶活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(LP PLA2)活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織長鏈脂酰輔酶A氧化酶(acyl-CoA oxidase)活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

組織長鏈脂酰輔酶A脫氫酶(ACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量elisa試劑盒    20次    *

 

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