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玉米迪克氏菌保存

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所  在  地上海市

更新時間:2020-12-01 13:33:18瀏覽次數:188次

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玉米迪克氏菌保存低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。

規格參數:
資源名稱  玉米迪克氏菌保存
種屬: Dickeya zeae

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應用領域: 天門冬酰胺

培養基: 0002

生長條件: 30℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

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儀器設備與器具:
1 恒溫培養箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養方法:
培養基 乳酸菌培養基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養基充分溶解,平板涂布,活化培養。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養。
生長條件 30℃,好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡單保存法,產品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細菌混合組成的相對穩定的細菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸細菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類細菌群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到細菌保存時,菌種是指細菌的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的細菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養物均可稱為該菌種的一個菌株。
人角膜成纖維細胞基礎培養基腦膜炎奈瑟菌拉丁屬名: Neisseria meningitidis

人表皮角質形成細胞基礎培養基金龜子綠僵菌用途: 生物防治

OptiTDS™小鼠心臟微血管內皮細胞組織解離液谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

PrimaCell™小鼠心臟微血管內皮細胞試劑盒釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人視網膜色素上皮細胞基礎培養基腐生葡萄球菌腐生亞種注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

人脂肪細胞基礎培養基釀酒酵母拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

人表皮黑色素細胞基礎培養基喜肌費爾酵母拉丁屬名: Fellozyma inositophila

小鼠腦微血管細胞組織處理緩沖液橄欖鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces  olivaceus

小鼠腦微血管細胞*培養基青紫黑鏈霉菌拉丁屬名: Syntrophomonas glaucovioatratus

Primarker™小鼠腦微血管細胞鑒定試劑盒豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS34規格: 1ml

PrimaCell™小鼠腦微血管細胞試劑盒乳微桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

OptiTDS™小鼠腦微血管細胞組織解離液小馬勃3-2注意事項: 僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

小鼠肺微血管內皮細胞*培養基東方伊薩酵母拉丁屬名: Issatchenkia  orientalis

Primarker™小鼠肺微血管內皮細胞鑒定試劑盒冷湖黃桿菌拉丁屬名: Flavobacterium psychrolimnae

小鼠腦微血管細胞生長因子少根根霉拉丁屬名: Rhizopus arrhizus

FibrOut™小鼠腦微血管細胞成纖維抑制劑解蛋白弧菌拉丁屬名: Vibrio proteolyticus
四號瓊脂基礎      *250No.4 Agar Base

我妻氏培養基基礎     *250Wagstsuma Agar Base

60%/L化鈉蛋白胨肉湯    *25060%/L NaCl Peptone Water

化鈉三糖鐵     *250NaCl Triple Sugar Iron Agar

胰胨大豆瓊脂斜面(TSA)   *250Tryptic Soy Agar

42℃生長培養基       *25042℃growth Medium

O/F培養基(HLGB)    *250O/F Medium
玉米迪克氏菌保存RAPD引物1克

17372-87-1曙紅Y水溶Acid Red 87

ELECTROSNAP8%ELECTROSNAP 試劑盒 8%500MLRT

4-溴-2- 4-Bromo-2-fluoro,99% 51436-99-8 5G 通用試劑

角鯊烯/反式角鯊烯/全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯/鯊烯/三十碳六烯/角鮫油素/魚肝油萜/2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯/Squalene BR,99% 25毫升 國產/進口

Lead(II)acetatebasic堿式醋酸鉛5克CP,98.5%

79-05-0丙酰胺PropionaMide;Propionic acid aMide

potewwiumxy7nogenphthalate本二酸氫鉀100克CP,97%

對磺酸鈉 p-sulfonic acid sodium salt,95% 657-84-1 50G 通用試劑

溴代十二烷 1-Bromododecane,97% 143-15-7 100G 通用試劑
微生物培養方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環圈在平板培養基表面,通過分區劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經培養后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面進行培養,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養過程復雜,對平板的要求比較高,產品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養基將蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿,輕輕搖動培養皿,使培養基溶液均勻分布在培養皿底部,待培養基溶液凝固后即得平板培養基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。

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