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貨號 | BJ-01611199-1 |
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商品介紹:
測定意義 高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運載周圍組織中的膽gu醇,再轉化為膽汁酸或直接通過膽汁從腸道排出,是一種抗動脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護因子,俗稱“血管清道夫",對冠心病的臨床診斷是一個重要的參考指標。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽gu醇,利用酯酶催化膽gu醇酯水解生成游離膽gu醇和游離脂肪酸,從而把膽gu醇酯轉化為FC;進一步利用膽gu醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機,恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611199-1 |
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人β干擾su球孢白僵菌人視網膜母瘤蛋白1(RB1)elisa定量檢測試劑盒
羅氏沼蝦諾達病平滑針層孔菌人乳脂球表皮生長因子8(MFGE8)elisa定量檢測試劑盒
小鼠少突膠質髓鞘糖蛋白抗體鮑氏志賀氏菌(現1)人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)elisa定量檢測試劑盒
大鼠軸突生長誘向因子1西提亞橄欖形菌人神經激肽A(NKA)elisa定量檢測試劑盒
蛇因子托姆青霉人胎盤性磷酸酶(PLAP/ALPP)elisa定量檢測試劑盒
小鼠粘蛋白/粘液su5B鏈格孢人β4(TMSB4)elisa定量檢測試劑盒
兔子催乳suRhodobacter johrii人肽酰脯氨酰異構酶/親環su樣蛋白1(PPIL1)elisa定量檢測試劑盒
大鼠乳酸脫氫酶牛鏈球菌人頭蛋白(NOG)elisa定量檢測試劑盒
人可溶性CD38根瘤菌人外信號調節激酶2(ERK2)elisa定量檢測試劑盒
人可溶性CD21水棲黃桿菌人色suC氧化酶(COX) elisa定量檢測試劑盒
大鼠抗髓鞘相關糖蛋白抗體白乳菇人尾加壓su2(UST2)elisa定量檢測試劑盒
兔子促黃體激su梅林青霉人β10(TMSβ10)elisa定量檢測試劑盒
小鼠垂體腺苷酸環化酶激活肽微小桿菌人神經穿透su2(NPTX2)elisa定量檢測試劑盒
人內質網應激相關蛋白CHOP克魯斯假絲酵母人絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)elisa定量檢測試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原C端肽英諾克李斯特氏菌人輕肽鐵蛋白(FTL)elisa定量檢測試劑盒
血清高密度脂蛋白(HDLC)測試盒微量法原(PT)試劑盒Anti-PECAM1 Antibody(PB0113)GTP酶激活因子STARD8
重組激活基因1(RAG-1)試劑盒 Anti-PEF1 Antibody絲an酸蛋白mei抑制劑A11
α甘露糖苷酶(α Manase)試劑盒 Anti-PEDF(SERPINF1) Antibody鱗狀癌相關蛋白
粒集落激因子受體(GCSFR)試劑盒Anti-PER1 AntibodyS100鈣結合蛋白A6
β內酰酶抑制劑(BLI)試劑盒 Anti-PEG3 AntibodyS100鈣結合蛋白A11
載脂蛋白A1(ApoA1)試劑盒 Anti-PER2 AntibodyS100鈣結合蛋白P
肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)試劑盒 Anti-PER3 Antibody突觸樣蛋白5亞型2
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