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貨號 | BJ-01611365-1 |
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特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱 | 檢測方法 | 規格 | 貨號 |
亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法 | 微量法 | 100管/96樣 | BJ-01611365-1 |
商品介紹:
測定意義: Hephaestin (HP)作為銅藍蛋白的同系物,是近年來發現的鐵轉運蛋白亞鐵氧化酶,HP屬亞鐵氧化酶家族成員,具有亞鐵氧化酶的活性,參與體內鐵代謝。HP的表達可受鐵、銅及鋅等金屬離子的調節。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介導鐵的跨膜轉運中有重要作用。 測定原理: HP催化Fe2+氧化為Fe3+,Fe2+和ferrozine反應顯色,在560 nm下有特征吸光值。通過測定Fe2+的減少速率可測得亞鐵氧化酶的活性。 自備用品: 酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。
注意事項:
待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。
一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。
標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。
抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。
葡萄糖氧化酶1抗體糞腸球菌蛋白mei(枯草桿菌)
轉錄調節因子HOXD9抗體阿孫鏈霉菌肝su鈉
羥基酰谷胱水解酶樣蛋白抗體同絲毛殼鏈脲佐菌su
熱休克蛋白受體家族蛋白7B2抗體食品檢測用鼠傷胸腺嘧啶
Heme結合蛋白2抗體解芽孢桿菌解亞種2′-脫氧腺苷-5′-三磷suan三鈉鹽
肝粘附分子2抗體大麗輪枝孢2′-脫氧胸苷-5′-二磷suan三鈉鹽
氨基己糖苷酶D抗體枯草芽孢桿菌-β-環糊精
HHLA2蛋白抗體白痢沙門氏菌亞硝鈷鈉
羥脯ansuan抗體放射桿狀根瘤菌萘酚AS-TR乙suan酯
熱休克蛋白10抗體壺黑蛋巢布諾德變型鎢suan銀
同源盒蛋白PRH抗體香菇大葉茜草su
羥類固脫氫酶17β抗體谷ansuan棒桿菌槲皮su-3-O-β-D- 葡萄糖
皰疹病相關泛su特異性蛋白mei7抗體釀酒酵母石斛
同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體黃曲霉五味子(北五味子)
異染色質蛋白1-α(HP1α)抗體棲土曲霉山藥
亞鐵氧化酶(HP)測試盒微量法低氧誘導因子1α (HIF-1α)試劑盒Anti-CCL4L1 Antibody β-連環蛋白抗原(β-β鏈接su)
肥大類胰蛋白mei(MCT)試劑盒Anti-CCNA1 Antibody磷suan化β-連環蛋白抗原
伴刀豆球蛋白A(ConA)試劑盒 Anti-CCNA1 Antibody微管蛋白(抗原)
蛋白酪ansuan磷suan酶受體B(PTPRB)試劑盒Anti-CCNA1 Antibody核凋亡誘導因子蛋白1(多肽)
色suP450家族成員7A1(CYP7A1)試劑盒 Anti-CCNA2 Antibody組織蛋白meiB抗原
β2糖蛋白1IgM(β2-GP1 Ab IgM)試劑盒Anti-CCNB1 Antibody組織蛋白meiL抗原
窖蛋白(Cav-1)試劑盒 Anti-CCNB1IP1 Antibody成骨特異性轉錄因子(多肽)
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
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