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ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-08-17 20:12:20瀏覽次數:218次

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貨號 BJ-01611208-1
ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法公司正在出售的產品:磷化ATP敏感性通道亞kir6.2抗體AQP9(aquaporin Protein-9) 水通道蛋白-9抗原 (多肽抗原)
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商品介紹:

測定意義

AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸與ATP反應生成淀粉合成的直接前體ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步驟。

測定原理

AGP催化的逆向反應生成G1P,在反應體系中添加的磷酸己糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,340nm下測定NADPH增加速率,即可計算AGP活性。

需自備的的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱

檢測方法

規格

貨號

ADPG焦磷酸化酶(AGP)測試盒微量法

微量法

100管/96樣

BJ-01611208-1

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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)充分混勻,室溫靜置30min后,450nm處測定各管吸光值A。

注意事項:

待測樣品-70℃可保存1個月。需注意反復凍融會導致SOD部分失活。

一個試劑盒如果不能在3次內使用完畢,其中的WST-8需要在使用時適當分裝,以避免反復凍融導致的檢測效果下降。

標準品稀釋時所用的稀釋液應盡量與樣品一致。樣品用試劑盒提供的SOD樣品制備液制備時,標準品也宜使用SOD樣品制備液進行稀釋;當樣品為血液等無需處理的樣品時,宜使用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液稀釋標準品。

抗氧化物會對本試劑盒的檢測產生干擾,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都會使測定出來的吸光度顯著升高。此時盡管樣品沒有顏色,如果設置了使用說明中的空白對照3,就可以消除樣品中的抗氧化物的干擾。

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

優點如下:

1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

6、回收試驗: X =103.3%。

7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。

8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。

人組織因子途徑抑制物居巖牙殖球菌人乙酰fu酶A(A-CoA)elisa定量檢測試劑盒

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小鼠嗜酸粒趨化因子釀酒酵母人破骨分化因子(ODF)elisa定量檢測試劑盒

大鼠血管性血友病因子裂解蛋白mei釀酒酵母人血管內皮生長因子D(VEGF-D)elisa定量檢測試劑盒

人白介su1多粘芽孢桿菌人外基質金屬蛋白mei誘導因子(EMMPRIN/CD147)elisa定量檢測試劑盒

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大鼠乙脫氫酶單增李斯特菌*人核苷磷酸化酶1(UPP1)elisa定量檢測試劑盒

人白介su1β (IL-1B)綠色木霉=木su木霉人可溶性髓系觸發受體-1(sTREM-1)elisa定量檢測試劑盒
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肌營養不良蛋白(DMD)試劑盒 Anti-POLR2A Antibody突觸結合蛋白11

C4結合蛋白α(C4BPα)試劑盒 Anti-POMT2 Antibody溶質載體家族蛋白21成員1C1

核孔蛋白205kda(NUP205)試劑盒Anti-POMC Antibody電壓門控鈉通道SCN3B蛋白

殺性/通透性增加蛋白(BPI)試劑盒  Anti-PON1 Antibody胞吐蛋白Sec6

胃粘液su(GM)試劑盒 Anti-PON1 Antibody神經突觸su13

環指蛋白4(RNF4)試劑盒Anti-PON1 Antibody多配體聚糖結合蛋白2


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