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小孢根霉華變種說(shuō)明書

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-11-24 11:48:16瀏覽次數(shù):325次

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小孢根霉華變種說(shuō)明書低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  小孢根霉華變種說(shuō)明書
種屬: Rhizopus│microsporus var. chinensis

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0014

生長(zhǎng)條件: 25-28℃

存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無(wú)菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無(wú)菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過(guò)渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來(lái)長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來(lái)源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
2,6-二氟酸酯13671-00-62,6-二氟酸酯13671-00-6

5-基-2-噻吩醛13679-70-45-基-2-噻吩醛13679-70-4

1-基-1H-咪-4-磺酰137049-00-41-基-1H-咪-4-磺酰137049-00-4

5-基喹喔啉13708-12-85-基喹喔啉13708-12-8

二叔基化膦13716-10-4二叔基化膦13716-10-4

三叔基膦13716-12-6三叔基膦13716-12-6

碳酸鎂13717-00-5碳酸鎂13717-00-5

3-氧基-4-胺13726-14-23-氧基-4-胺13726-14-2

Boc-L-羥脯氨酸13726-69-7Boc-L-羥脯氨酸13726-69-7

4-[2-(2-氨基-4,7-二-4-氧代-3H-吡咯并[2,3]嘧啶-5-基)基]酸137281-39-14-[2-(2-氨基-4,7-二-4-氧代-3H-吡咯并[2,3]嘧啶-5-基)基]酸137281-39-1

137-43-9137-43-9

4--3-氟酸137504-86-04--3-氟酸137504-86-0
鹽利托君   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>98%,BR純度:98%

鹽利托君(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%

茚地韋   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>97%純度:≥98%

他唑巴坦鈉    進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:含量>90%%,BR純度:≥95%

他唑巴坦鈉 (標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%

D環(huán)絲氨   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>98%,效價(jià)>900µg/mg,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)純度:≥98%

D環(huán)絲氨(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:標(biāo)準(zhǔn)品用于含量測(cè)定純度:≥98%

鹽四環(huán)素   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:Purity>98%,Potency≥900μg/mg, USP grade純度:≥97%

鹽四環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:95% 98%

羧芐青霉素鈉/羧芐西林鈉   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>90%,BR純度:≥95%

羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:含量測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)品純度:98%

芬達(dá)唑;咪唑   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>99%純度:≥98%

芬達(dá)唑;咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%

前列鈉(D型)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>98.5%純度:≥98%

前列鈉(DL型)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:>98.5%,USP34純度:≥98%

鹽川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)   進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)  規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度:≥98%

PAP1/Acid Phosphatase  性酶一抗    * 0.2ml Etogestrel

Bone Alkaline Phosphatase/AKP2  骨堿性酶一抗    * 0.2ml Everolimus;RAD001

Prostatic Acid Phosphatase  前列腺性酶一抗    * 0.2ml Fluocilone Acetonide

Oncostatin M  癌基因蛋白抑瘤素M一抗    * 0.2ml Fluocilone Acetonide

CDR2/PCD17  小腦變性相關(guān)蛋白2一抗    * 0.2ml Flupirtine maleate

HLC3/Kanadaptin  肺癌癌基因蛋白3一抗    * 0.2ml Flupirtine maleate

OVCA2  卵巢癌相關(guān)基因2蛋白一抗    * 0.2ml Fulvestrant

PRUNE/DRES17  癌相關(guān)蛋白DRES17一抗    * 0.2ml Gestodene
小孢根霉華變種說(shuō)明書小鼠胚胎細(xì)胞,NIH/3T3細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠前胃癌細(xì)胞,MFC細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞,MA-891細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠癌細(xì)胞,4T1細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,G422細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠腎癌細(xì)胞,RENCA細(xì)胞1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過(guò)分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過(guò)程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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