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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
ATP5E蛋白抗體 | ATP5E | BJ-K6532 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養雜交瘤細胞:體外培養雜交瘤細胞,從培養液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
前體mRNA裂解復合物2蛋白Pcf11多克隆抗體100 ul PCF11 Polyclonal Antibody
前蛋白關聯子宮內膜蛋白/胎盤蛋白14多克隆抗體100 ul PAEP Polyclonal Antibody
前列腺素F2α受體多克隆抗體100 ul PF2R Polyclonal Antibody
前膠原賴氨酸-2-酮戊二酸-5-雙加氧酶2多克隆抗體100 ul PLOD2 Polyclonal Antibody
前膠原C內肽酶增強子1多克隆抗體100 ul PCOC1 Polyclonal Antibody
前動力蛋白受體2多克隆抗體100 ul PKR2 Polyclonal Antibody
前RNA剪接因子SYF2多克隆抗體100 ul SYF2 Polyclonal Antibody
前mRNA剪接因子40同源物A多克隆抗體100 ul PR40A Polyclonal Antibody
前mRNA剪接因子38B多克隆抗體100 ul PR38B Polyclonal Antibody
前mRNA加工剪接因子8同源物多克隆抗體100 ul PRP8 Polyclonal Antibody
前-B-淋巴細胞基因1多克隆抗體20 ul VPREB Polyclonal Antibody
遷移侵襲增強因子1多克隆抗體100 ul MIEN1 Polyclonal Antibody
起始識別復合物亞基6多克隆抗體100 ul ORC6 Polyclonal Antibody
起始識別復合物亞基5多克隆抗體100µl ORC5 Polyclonal Antibody
起始識別復合物亞基4多克隆抗體100 ul ORC4 Polyclonal Antibody
ATP5E蛋白抗體短裙竹蓀3-3freeze-dried魯氏接合酵母
紡錘形擬酵母Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..莫格球擬酵母
蒂莫內馬賽菌Agaricus bisporus (Lange) Imbach, eomorph紅平紅球菌
蘋果鏈格孢Homo sapiens, human放射性根瘤菌
長雙歧桿菌Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..施氏假單胞菌
發酵假絲酵母Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..枯草芽孢桿菌
牡丹葡萄孢Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..褐球固氮菌
黃色桿菌Corynebacterium ammoniagenes (Cooke and Kei ..巨大芽孢桿菌
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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