客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。

產品名稱：鈣熒光探針Fluo-3, AM  

規格：100 μg/1 mg/10×100 μg

貨號：BJP1186

分類：熒光核酸試劑

產品僅用于科研儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。

運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

染料法

探針法　

可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等

實驗報告

·電泳圖   ·標準曲線 

·溶解曲線 ·擴增曲線

·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時，熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。

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檢測步驟：

一、 試劑的準備

從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：

試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量

熒光PCR反應液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。

7.2 qPCR反應條件

將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。

推薦循環條件:

1循環 50℃ for 2 min

預變性 1循環 95℃ for 10 min

PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

制霉菌素實驗步驟SimpleChIP® Human γ-Actin Intron 3 Primers100 ul

鹽酸萬古霉素實驗步驟mTOR (7C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

克拉霉素價格STING (D1V5L) Rabbit mAb (Rodent Preferred)100 ul

溶葡球菌酶實驗步驟Sox2 (D6D9) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

纖維素酶R-10價格PDI (C81H6) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

20mg/ml蛋白酶K溶液使用說明書Drebrin (pan) Antibody100 ul

5-溴-4氯-3-吲哚N-乙酰-β-D-氨基半乳糖苷保存Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb20 ul

多酚氧化酶（菌菇）價格Argonaute 1 (D84G10) XP® Rabbit mAb100 ul

肌酐酶使用說明書Argonaute 3 (D15D2) Rabbit mAb100 ul

抑肽酶（牛肺）保存LRF/Pokemon (D7U2O) Rabbit mAb100 ul

碳酸酐酶（牛紅血球）價格Phospho-Akt (Thr308) (C31E5E) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

3',6'-二氯熒光素使用說明書β-Actin (13E5) Rabbit mAb (Biotinylated)100 ul

2-（5-溴-2-吡啶偶氮）-5-（二乙氨基）酚使用說明書NPC1L1 Antibody100 ul

N-乙基-N-（2-羥基-3-磺丙基）-3-甲基本鈉鹽保存Granzyme B (D2H2F) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

2-氨基吖啶酮實驗步驟α-Tubulin (11H10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)100 ul

DL-異檸檬酸三鈉鹽使用說明書RKIP (G38) Antibody100 ul

酵母聚糖A實驗步驟HO-1 (P249) Antibody100 ul
鈣熒光探針Fluo-3, AM  腸炎沙門氏菌種屬: Salmonella enteritidis西林瓶，定性菌片安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究；教學；分類。培養基: 營養肉汁瓊脂：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產生芽孢。生長條件: 37℃，好氧。生長特性: 革蘭氏陰性桿菌，大小為0.6-2.0μm × 1.0-4.0μm，通常以周生鞭毛運動；兼性厭氧，營養要求不高；不能利用檸檬酸鹽作為碳源；產氣，大多數菌株不產生H2S，發酵阿拉伯糖而不發酵木糖，僅對人致病，能夠引起與傷寒類似的癥狀。存儲條件: -20℃避光保存；運輸條件：冰袋運輸。

Alternaria│tenuissima斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0014生長條件: 25℃

Trichoderma│sp.分離基物: 植物凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0014生長條件: 18-26℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Erythrobacter│citreus分離基物: 沉積物/土黃色沉積物上覆水凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 1、海洋石油污染生物修復； 2、生物活性物質篩選。培養基: 821生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Vibrio│sp.分離基物: 生物樣/赤點石斑魚腸體內容物凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 共生微生物/赤點石斑魚腸道共生菌培養基: 33生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Asaia│sp.分離基物: 野生諾尼果內凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: CM0033生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法

Chromohalobacter│sp.分離基物: 水樣/表層海水斜面培養物模式菌株: no應用領域: 微生物/高鹽菌（鹽度20%-26%）培養基: 471生長條件: 20-25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法

Xanthomonas│campestris pvar. juglandis (Pammel) Dowson分離基物: 枝斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 141生長條件: 30存儲條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Nocardioides│terrigena分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 832生長條件: 18℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
操作程序：

由您提供該實驗中目的基因的相關資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務的可能性和技術路線；

商定服務收費、付款方式、服務期限等，并簽定技術服務合同。

有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本（100mg組織或107個細胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設計合成（費用另計）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數據分析。

產品僅用于科研提供實驗報告，包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數據等。