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當前位置:上海邦景實業有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光核酸試劑>> 100 μg/1 mg/10×100 μg鈣熒光探針Fluo-4, AM

鈣熒光探針Fluo-4, AM

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具體成交價以合同協議為準

產品型號100 μg/1 mg/10×100 μg

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-01-07 10:55:25瀏覽次數:219次

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鈣熒光探針Fluo-4, AM 實時熒光定量PCR技術,是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。

產品名稱:鈣熒光探針Fluo-4, AM  

規格:100 μg/1 mg/10×100 μg

貨號:BJP1184

分類:熒光核酸試劑
產品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。

運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

染料法

探針法 

可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等

實驗報告

·電泳圖   ·標準曲線 

·溶解曲線 ·擴增曲線

·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告

儲存條件:

14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。

5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法:

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。

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檢測步驟:

一、 試劑的準備

從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。

設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:

試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量

熒光PCR反應液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。

7.2 qPCR反應條件

將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。

推薦循環條件:

1循環 50℃ for 2 min

預變性 1循環 95℃ for 10 min

PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:

由您提供該實驗中目的基因的相關資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務的可能性和技術路線;

商定服務收費、付款方式、服務期限等,并簽定技術服務合同。

有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數據分析。

產品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數據等。

客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。

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鈣熒光探針Fluo-4, AM  Aspergillus│oryzae凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Streptomyces│ambofaciens凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產生螺旋霉素培養基: CM0012生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥

Alphaherpesvirinae│Infectious laryngotracheitis virus分離基物: 病雞凍結物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 教學研究培養基: 0生長條件: 37

Salmonella│paratyphi A分離基物: 血其他安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 研究培養基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 定期移植法

Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.分離基物: 柞樹斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 14生長條件: 25-32存儲條件: 定期移植法

Sporobolomyces│sp.分離基物: 植物葉片凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 0013生長條件: 17℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

Aspergillus│flavus凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 其他

Emericella│nidulans分離基物: 土壤凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗真菌(煙曲霉)培養基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結;真空冷凍干燥

Geobacillus│sp.分離基物: 砂土凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 859生長條件: 70℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法

 

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