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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
磷酸化腺瘤樣息肉抗體 | phospho-APC (Ser2054) | BJ-K6997 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體。或者,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化?
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
CCL13/MCP-4/FITC 熒光素標記單核細胞趨化蛋白4IgGBCL7B蛋白2-(*硅基)乙Mouse U-T4 (Ultrasensitivity Thyroxine) 檢測試劑盒
CCL14/HCC-1/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白14IgG堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)2-(*硅基)乙Mouse U-T3 (Ultrasensitivity Triiodothyronine) 檢測試劑盒
CYLD/cylindromatosis 1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠微管結合蛋白CYLDIgGB細胞白血病/淋巴瘤蛋白72-(*硅基)乙Mouse PLAU/uPA(Urokinase-Type Plasminogen Activator) 檢測試劑盒
phospho-CYLD(Ser418) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化微管結合蛋白CYLDIgG先天性脂肪代謝障礙蛋白2(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)4--4’-硝基聯Mouse Cr (Creatinine) 檢測試劑盒
CCL15/MIP5/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白15IgGB細胞遷移基因14--4’-硝基聯Mouse VEGF-B (Vascular Endothelial cell Growth Factor B) 檢測試劑盒
CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白16IgG脊髓小腦共濟失調蛋白BEAN12,9-二氯-1,10-菲羅啉Mouse VEGF-C (Vascular Endothelial cell Growth Factor C) 檢測試劑盒
CCL17/TARC/FITC 熒光素標記胸腺活化調節(jié)趨化因子IgGB7H6蛋白2,9-二氯-1,10-菲羅啉Mouse VEGF-D (Vascular Endothelial cell Growth Factor D) 檢測試劑盒
ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標記抗嗜酸粒細胞趨化蛋白2IgGB細胞特異性轉錄因子環(huán)丁Mouse VEGFR3/Flt4 (Vascular Endothelial Cell Growth Factor Receptor 3) 檢測試劑盒
DDC/FITC 熒光素標記多巴胺脫羧酶IgGC2CD4D蛋白2,8-二溴二并噻吩Rat EGR3 (Early Growth Response Protein 3) 檢測試劑盒
DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標記CD205IgG二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白51-異酸辛酯Rat GLUT1 (Glucose Transporter 1) 檢測試劑盒
Dectin-1/CLECSF12/FITC 熒光素標記C型凝集素結構域家族7成員AIgGL-型電壓依賴型鈣通道β1-異酸辛酯Rat GLUT2 (Glucose Transporter 2)檢測試劑盒
Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 熒光素標記C型凝集素結構域家族6成員AIgG過氧化氫酶1-異酸辛酯Rat AChE (Acetylcholinesterase) 檢測試劑盒
Dectin-1/CLECSF12/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記C型凝集素結構域家族7成員AIgG細胞色素P450 2C193-鄰二甲Rat MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) 檢測試劑盒
DDX4/MVH/FITC 熒光素標記DDX4IgG心肌特異性肌鈣蛋白T3-鄰二甲Rat ELA4 (Elastase 4) 檢測試劑盒
Defensin Beta1/FITC 熒光素標記防御素β1IgGCD1613-鄰二甲Rat EMILIN 1 (Elastin Microfibril Ierface Located Protein 1) 檢測試劑盒
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC 熒光素標記防御素β2IgG7號染色體開放閱讀框653,4-二甲基Rat ELOA (Elongin A) 檢測試劑盒
磷酸化腺瘤樣息肉抗體Ceratosphaeria│phyllostachydis Zhang分離基物: 枝桿提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26-28定期移植法
Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
Neosartorya│fischeri提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Rhizopus│stolonifer提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no抗HIV培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C真空冷凍干燥
Rhodothermus│marinus分離基物: 水樣/上層溫泉水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no微生物/高溫(75℃)培養(yǎng)基: 471生長條件: 75℃液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│awamori提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法
Nematospora│coryli分離基物: 野生諾尼種子內提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
Ruania│sp.分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: yes培養(yǎng)基: 38生長條件: 37℃液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
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