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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書

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品       牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2019-02-26 14:31:39瀏覽次數(shù):238次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書根據(jù)要保存的各樣本的體積,計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。

RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書的詳細(xì)介紹:

DNA提取流程圖:
?公司RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更RNA純化
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書當(dāng)DNA 段長度較長(5   kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
    1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
    2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過程中對(duì)長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長時(shí)間暴露在紫外等下。
注意事項(xiàng):
● RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
形態(tài)學(xué)染色液(巴氏法),4*20ml 進(jìn)口/原裝

形態(tài)學(xué)染色液(Shorr法),3*100ml 進(jìn)口/原裝

形態(tài)學(xué)染色液(Shorr法),3*20ml 進(jìn)口/原裝

微絲染色液(R250法),5*20ml 進(jìn)口/原裝

微絲染色液(R250法),5*50ml 進(jìn)口/原裝

堿性蛋白染色液(細(xì)胞),2*50ml 進(jìn)口/原裝

堿性固綠染色液,2*50ml 進(jìn)口/原裝

酸性固綠染色液,2*50ml 進(jìn)口/原裝

軟骨染色液(甲苯胺藍(lán)法),100ml 進(jìn)口/原裝

軟骨染色液(阿利新藍(lán)法),50ml 進(jìn)口/原裝

軟骨染色液(番紅O法),100ml 進(jìn)口/原裝

改良番紅O-固綠軟骨染色液,5*100ml 進(jìn)口/原裝

改良番紅O-固綠軟骨染色液,5*50ml 進(jìn)口/原裝

Mallory PTAH染色液(自然氧化法),100ml 進(jìn)口/原裝

Mallory磷鎢酸蘇木素染色液(PTAH自然氧化法),3*100ml 進(jìn)口/原裝
RNase-free Tris HCl,1M,pH 8.5100mL說明書α-Ketoglutaricacidpotassiumsalt規(guī)格:>98%,BR

α-HydroxyTamoxifen規(guī)格:美國進(jìn)口

α-HydroxyMetoprolol(MixtureofDiastereomers)規(guī)格:美國進(jìn)口

α-hederin規(guī)格:供含量測定用

α-Endosulfansolution規(guī)格:10μg/ml,u=5%

α-Endosulfan規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品

α-Descyclohexyl-α-phenylOxybutynin規(guī)格:美國進(jìn)口

α-Cyperone規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

α-Cyclodextrin規(guī)格:>98%,BR

α-Apo-oxytetracycline規(guī)格:美國進(jìn)口

 

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