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產地 | 進口 | 加工定制 | 是 |
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適用領域 | 科研 |
豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用 |
規格 | 50T |
價格 | 來電可享受優惠 |
特點優勢:
1. 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用特異性:
2. 重現性:
3. 靈敏性:
4. 實用性:
性能指標:
1. 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用試劑盒檢測特異性為
2. 檢測試劑盒重現性為
3. 靈敏度可達到103/ml
4. 有效期為6個月
特點:
1. 豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用一站式,足夠 50 次酶切-連接反應、50 次預擴反應和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 體系計算),但不包括 DNA 純化和帶型分析試劑(如 PAGE 電泳試劑和 銀染試劑)。
2. 本系列產品提供 EcoRI-MseI 組合,適用于 GC 含量在 50%以上的基因組。對 GC 含量在 50%以下的基因組,需從本公司采購 AFLP(EcoRI-TaqI)組合。
3. 各種參數都經過優化,一次 PCR 所得 AFLP 片段數一般在 10-100 之間,可重復 性好,誤差小于 0.6%。4. 本產品適用于基因組在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如動物和植物),對于基因組 在 50-500 Mb 的材料(如細菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如質粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分別另購專門的+1 型預擴引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 種)AFLP 引物對。
技術概論:
豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用聚合酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期發展起來的體外核酸擴增技術。它具有特異、敏感、產率高、快速、簡便、重復性好、易自動化等突出優點;能在一個試管內將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數小時內擴增至十萬乃至百萬倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發、一滴血、甚至一個細胞中擴增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情,用PCR幾小時便可完成。PCR技術是生物醫學領域中的一項革命性創舉和里程碑。
PCR反應體系與反應條件
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
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Palladium(II)nitratedihydrate硝酸鈀質量規格:干品Cefquinome>80%,BR
Palladium,powder鈀粉(>99%,BR)質量規格:干品Cloxacillin>90%,一水
Pararosanilineacetate乙酸副品紅(>85%,BS)質量規格:干品Purity≥98.0%
Paxilline*,fromPenicilliumpaxilli鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉質量規格:干品純度≥90.0%,干品含量≥85.0%,USP34
Penicillicacid青霉酸(>98%(HPLC),BC)質量規格:干品含量>98%,USP32
PenitremAfromPenicilliumpalitans青霉震顫素(>95%(HPLC),BC)質量規格:干燥劑用
Pentaacetyl-β-D-galactopyranoseβ-D-半乳糖五乙酸酯(>98%,BR)質量規格:干燥劑用
Permutit人造沸石質量規格:干燥劑用
Phenolphthaleindiphosphatetetrasodiumsalt酚肽二磷酸四鈉(>96%,BC)質量規格:干燥劑用
Phenothiazine吩噻嗪(>98%,BR)質量規格:高純級,98%
Phenoxyacetiacidsodiumsalt苯氧乙酸鈉(>98%,BR)質量規格:工業級
Phenylsalicylate水楊酸苯酯(>98%,BR)質量規格:工業級
PhospholipaseA2fromCrotalusadamanteusVenom磷脂酶A2質量規格:工業級
p-Hydroxybenzoicacidbutylestersodiumsalt對尼泊金丁酯鈉(>98%,USP)質量規格:供GC法檢查用
p-Hydroxybenzoicacidethylestersodiumsalt尼泊金乙酯鈉(>98.5%,BR)質量規格:供HPLC法測定
豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用QSG-7701(人正常肝細胞)5×106cells/瓶×2SK-N-SH(神經母細胞瘤)
CL-0207SHG-44(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
PROCROthersHuman人Epcr/PROCR人細胞裂解液(陽性對照)
BNLCL.2小鼠胚胎肝細胞BNLCL.2mouseembryolivercellsDMEM培養基+10%FBS
IL18BPProteinHuman重組人IL18BPa蛋白(His&Fc標簽)
小鼠食管上皮細胞*培養基100mL
Phospho-Cofilin(Ser3)磷酸化絲切蛋白抗體規格:0.1ml
COLEC12凝集胎盤蛋白1抗體規格:0.2ml
CollagenIⅠ型膠原抗體規格:0.1ml
CollagenIIⅡ型膠原抗體規格:0.1ml
CollagenIII抗Ⅲ型膠原抗體規格:0.1ml
PCR反應五要素:
豬瘟病毒RT-PCR試劑盒科研用參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
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