當前位置:上海邦景實業有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光核酸試劑>> 5 g/25 gN-BOC-乙二胺 基因擴增儀
產品名稱:N-BOC-乙二胺
規格:5 g/25 g
貨號:BJP1263
分類:熒光核酸試劑
產品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標準曲線
·溶解曲線 ·擴增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
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檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務的可能性和技術路線;
商定服務收費、付款方式、服務期限等,并簽定技術服務合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數據分析。
產品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數據等。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
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N-BOC-乙二胺Escherichia│coli斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 用于L. buchneri MD-1的乳酸脫氫酶基因ldhD的表達培養基: 33生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Acremonium│sp.斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抗癌活性培養基: CM0014生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Clitocybe│maxima (Gartn. & G. Mey.) P. Kumm.分離基物: 子實體斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no培養基: 14生長條件: 28存儲條件: 定期移植法
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Bacillus│cereus分離基物: 口防風凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 抑制沙門氏菌、抑制梨黑霉病原菌、抑制炭疽霉病原菌培養基: CM0003生長條件: 35-37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 死亡仔豬十二指腸凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領域: 用于科研培養基: 335生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia│coli斜面培養物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 保存HIV gag的NC區基因,載體pcDNA3.1,N端Luc標簽培養基: CM0033生長條件: 37C存儲條件: 液氮超低溫凍結
Neurospora│crassa凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: crisp培養基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Idiomarina│sp.分離基物: 鹽礦沉積物凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養基: 444生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
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