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丙酮酸脫氫酶(PDH)微量法檢測試劑盒

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產品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 09:44:58瀏覽次數:242次

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貨號 GOY-01S6577
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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

丙酮酸脫氫酶(PDH)微量法檢測試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6577

商品介紹

測定意義

PDHEC 4.1.1.1)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是丙酮酸脫氫酶復合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,催化丙酮酸脫梭生成-TPP,把糖酵解和三羧酸循環連接起來。

測定原理

PDH催化丙酮酸脫氫,同時還原WST-8產生黃色物質,從而導致450nm光吸收的增加。

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。

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塑料蓋和墊片,匹配20L鋁桶,φ99.4*32犬胰蛋白原激活肽(TAP)免疫試劑盒酪氨蛋白激受體B4抗體NeuroD1/NEUROD  神經分化因子1抗體

2- 98%犬胰蛋白原-1 免疫試劑盒酪氨蛋白激A5受體抗體Neurocan  神經粘蛋白抗體

2-溴代異丁 98%犬胰蛋白(trypsin)免疫試劑盒上皮鈉離子通道蛋白γ/γENaC抗體Neurobeachin  蛋白激錨定蛋白抗體

1,2,3,4-丁烷四羧 99%犬一氧化氮(NO)免疫試劑盒癌因ETS2抗體Neurexin 2  軸突蛋白2抗體

3-溴-5- 98%犬葉(FA)免疫試劑盒內皮素3抗體Neurexin 1  軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體

二二氨鈀 Pd ≥50% 犬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒化外信號調節激5抗體NeuN  神經元核抗原抗體

2-乙酯 98%犬血纖蛋白原(Fbg)免疫試劑盒化外信號調節激5抗體NEU4  神經氨4抗體

溴乙乙酯 98%犬血栓素B2(TXB2)免疫試劑盒外信號調節激4抗體Netrin G2  軸突生長誘向因子G2抗體

2-溴丁乙酯 98%犬血栓前體蛋白(TpP)免疫試劑盒腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7抗體Netrin G1 ligand  軸突生長誘向因子G1配體抗體

2-溴已乙酯  99%犬血栓調節蛋白(TM)免疫試劑盒化絲裂原活化蛋白激ERK抗體Netrin 4  軸突生長誘向因子4抗體

三化金水溶液 Au 23.5~23.8%犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)免疫試劑盒CD312抗體NETO1  腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體

2-溴丁酯  97%犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒eIF4E結合蛋白抗體NET1  神經上皮轉化因1抗體

2-溴已酯  98%犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒化因子受體抗體NET1  去素轉運蛋白/神經遞質去素轉運體抗體

2-酯  97%犬血管緊張素轉化2(ACE2)免疫試劑盒化因子受體抗體Nestin  巢蛋白/神經上皮干蛋白抗體

 


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