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α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-27 09:40:34瀏覽次數:268次

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貨號 GOY-01S6571
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測定步驟:

1、 酶標儀預熱30min以上,調節波長至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。

5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。

【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)微量法

100管/96樣

微量法

GOY-01S6571

商品介紹

測定意義

α-KGDHEC 1.2.4.2)廣泛存在于動物、植物微生物和培養細胞的線粒體中,是三羧酸循環調控關鍵酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脫羧生成琥珀酰。

測定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和生成琥珀酰、 二氧化碳和 NADHNADH340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通常可以使測定正常。

聚二乙烯苯多孔小球GDX-102 80-100目液體石蠟 ARAnti-IRF7 /FITC  熒光素標記干擾素調節因子7抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 40-60目山梨酸 AR,99%Anti-Phospho-IRF7 (Ser471/472) /FITC  熒光素標記化干擾素調節因子7抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-103 60-80目 CP,99.0%Anti-IRS-1/FITC   熒光素標記胰島素受體底物-1抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-104 60-80目磺嘧銀 98%Anti-phospho-IRS1(Tyr895)/FITC   熒光素標記化胰島素受體底物-1抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-201 60-80目磺胍 98%Anti-phospho-IRS1(Tyr1222)/FITC   熒光素標記化胰島素受體底物-1抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-301 80-100目磺嘧 分析標準品Anti-phospho-IRS1(Ser1101)/FITC   熒光素標記化胰島素受體底物-1抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-501 60-80目磺嘧 98%Anti-phospho-IRS1(Ser302) /FITC   熒光素標記化胰島素受體底物-1抗體IgG

聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 40-60目甜蜜素 藥用級Anti-phospho-IRS1(Ser332/336)/FITC   熒光素標記化胰島素受體底物-1抗體IgG

α酮戊二酸脫氫酶(αKGDH)微量法(2-二膦乙) 96%Anti-FASN/FITC  熒光素標記抗脂肪合成抗體IgG雞解旋樣轉錄因子(HLTF)聯免疫吸附測定試劑盒

(1S,2S)-2-(二膦)環己 97%Anti-FasL/FITC  熒光素標記FasL蛋白抗體IgG雞血管緊張肽A(ATA)聯免疫吸附測定試劑盒  

(1S,2S)-(-)-1, 2-二-1, 2-乙二 98%Anti-FAST kinase/FITC  熒光素標記抗Fas活化的絲/蘇氨激抗體IgG雞葡萄糖變位(PGM)聯免疫吸附測定試劑盒

(1S,2S)-N-(對磺酰)-1,2-二乙二 98%Anti-FBN1 /FITC  熒光素標記原纖維蛋白1抗體IgG雞延伸蛋白A(EloA)聯免疫吸附測定試劑盒

(1S,2S)-(+)-N,N'-二環己烷-1,2-二 98%Anti-Fc GammaR II A/CD32a/FITC  熒光素標記免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體IgG雞血小板相關抗體IgM(PA-IgM)聯免疫吸附測定試劑盒

(1S,2S)-(-)-1,2-環己二D-鹽 98%Anti-FDC-SP/FITC  熒光素標記抗B淋巴表面結合蛋白抗體IgG雞前列腺素內過氧化物合2(PTGS2/COX-2)聯免疫吸附測定試劑盒

(S,S)-2,6-雙(4-異-2-惡唑啉-2-)吡 99%Anti-Fe65 protein/FITC  熒光素標記Fe65 蛋白抗體IgG雞趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)聯免疫吸附測定試劑盒

(S,S)-N-(對磺酰)-1,2-二乙烷二(對異)化釕(II) Anti-FGF1/FITC  熒光素標記性成纖維生長因子雞白分化抗原CD109(CD109)聯免疫吸附測定試劑盒

二乙酰[(S)-(-)-2,2'-雙(二-P-酰)-1,1'聯萘]釕 95%Anti-FGF3/Oncogene INT2 /FITC  熒光素標記纖維母生長因子3抗體IgG雞軟骨糖蛋白39(GP39)聯免疫吸附測定試劑盒

2,2′:6′,2′′-三吡 98%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC  熒光素標記纖維母生長因子4抗體IgG雞血小板反應蛋白2(TSP-2)聯免疫吸附測定試劑盒

 97%Anti-FGF5/FITC  熒光素標記纖維母生長因子5抗體IgG雞天青殺素1(AZU1)聯免疫吸附測定試劑盒  

三特丁膦 1.0 M in tolueneAnti-KGF/FGF-7/FITC  熒光素標記角質形成生長因子受體/纖維母生長因子-7抗體IgG雞白介素3介導核因子(NFIL3)聯免疫吸附測定試劑盒

(二亞芐酮)二鈀,加合物 98%Anti-FGF-8/HBGF-8/FITC  熒光素標記成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8抗體IgG雞胃蛋白原C(PGC)聯免疫吸附測定試劑盒

三氟乙酰酮 98%Anti-FGF-13/FITC  熒光素標記抗纖維母生長因子-13抗體IgG雞性別決定區Y框蛋白2(SOX2)聯免疫吸附測定試劑盒

(2-)膦 97%Anti-FGF-10/FITC  熒光素標記成纖維生長因子-10/纖維母生長因子-10抗體IgG雞S-轉移θ1(GSTθ1/GSTt1)聯免疫吸附測定試劑盒

 


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